堿性成纖維細(xì)胞生長因子對犬角膜上皮細(xì)胞增殖影響的研究.pdf

1、本文制作了角膜上皮細(xì)胞，采用DMEM/F-12培養(yǎng)液培養(yǎng)，將培養(yǎng)到第三代的角膜上皮細(xì)胞用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法觀察堿性成纖維細(xì)胞生長因子在不同濃度(0ng/mL，1ng/mL，10ng/mL，100ng/mL)和不同時間點(diǎn)(24h，48h，96h)對犬角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)增殖性能來研究堿性成纖維細(xì)胞生長因子對犬角膜上皮細(xì)胞的生長和增殖的影響，檢測所的的結(jié)果表示為光密度值(OD)值，OD值的大小與細(xì)胞密度呈正比。結(jié)果表明，從1ng/m

2、L開始，隨濃度遞增，OD值逐漸上升，10ng/mL時達(dá)到峰值，此后隨濃度遞增OD值下降。bFGF組從lng/mL開始各濃度組OD值均大于對照組(P<0.05)，說明bFGF對犬角膜上皮細(xì)胞有明顯的促分裂作用。10ng/mL組在24h、48h、96h均高于其他劑量組。說明堿性成纖維細(xì)胞生長因子有明顯促進(jìn)犬角膜上皮細(xì)胞增殖的作用，在一定范圍內(nèi)呈劑量依賴性，10ng/mL為促進(jìn)犬角膜上皮生長的最佳劑量。 此外，建立了犬角膜環(huán)鉆損傷模型

3、，分析堿性成纖維細(xì)胞生長因子對犬角膜損傷的治療效果。將24只雜交犬隨機(jī)分成四組：生理鹽水對照組、0.1μg/mL bFGF組、0.5μg/mLbFGF組、1μg/mLbFGF組。每組使用不同濃度的bFGF點(diǎn)眼，每日三次，每次兩滴。并在術(shù)后第1d、第3d、第5d、第7d同一時間用熒光染色素鈉染液點(diǎn)眼，照相觀察角膜上皮愈合效果。并于術(shù)后第3d、第7d、第14d取角膜各5只制作病理切片觀察角膜上皮愈合情況及膠原纖維排列情況、成纖維細(xì)胞生長情況

4、。熒光染色結(jié)果表明，環(huán)鉆損傷后第1 d，0.5μg/mL劑量組愈合率為27.47％，1μg/mL劑量組愈合率為312.3％，與對照組相比差異極顯著(P<0.01)。環(huán)鉆損傷后第3d、第5d不同濃度的bFGF各組愈合率均極顯著高于對照組(P<0.01)，第7d時除對照組有兩例愈合不良外各組均基本愈合。顯示堿性成纖維細(xì)胞生長因子能促進(jìn)犬角膜損傷后角膜上皮愈合，早期應(yīng)用即能發(fā)揮作用。病理切片觀察發(fā)現(xiàn)添加堿性成纖維細(xì)胞生長因子的犬角膜上皮修復(fù)快