戊四氮點(diǎn)燃模型中RhoGTP酶與苔蘚纖維出芽相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：動(dòng)態(tài)觀察戊四氮（PTZ）慢性點(diǎn)燃模型組和Rho激酶抑制劑法舒地爾（fasudil）干預(yù)組中Rho GTP酶家族成員Racl和RhoA在海馬各區(qū)的表達(dá)變化及苔蘚纖維出芽的程度，探討Rho GTP酶及其參與的信號(hào)通路在苔蘚纖維出芽過程中發(fā)揮的作用，并推斷法舒地爾對(duì)癲癇的可能作用。 方法： 1）健康雄性SD大鼠（體重約200克）210只隨機(jī)分為PTZ組（n=84）、法舒地爾干預(yù)組（n=84）和生理鹽水對(duì)照組（n=42）。

2、PTZ組大鼠每日腹腔注射閾下劑量PTZ30mg/kg，制作點(diǎn)燃癲癇模型；干預(yù)組先腹腔注射法舒地爾15mg/kg，半小時(shí)后注射PT230mg/kg；對(duì)照組腹腔注射等量無菌生理鹽水。根據(jù)Racine標(biāo)準(zhǔn)判定癲癇發(fā)作的程度。選取第一次給藥后1天、3天、1周、2周、4周、6周和8周為研究時(shí)間點(diǎn)，將三組分成七個(gè)亞組，以海馬CA3區(qū)和齒狀回門區(qū)為研究部位。 2）不同時(shí)間點(diǎn)行Timm染色觀察齒狀回門區(qū)和海馬CA3區(qū)苔蘚纖維出芽情況。

3、3）免疫組化方法檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)海馬各區(qū)Racl、RhoA的表達(dá)變化。 結(jié)果： （1）癲癇行為學(xué)觀察：PTZ組和法舒地爾干預(yù)組在癇性發(fā)作級(jí)別，出現(xiàn)癇性發(fā)作時(shí)間和點(diǎn)燃率上均無明顯差異。 （2）苔蘚纖維出芽的動(dòng)態(tài)變化：在各時(shí)間點(diǎn)，PTZ組和干預(yù)組之間CA3區(qū)苔蘚纖維出芽評(píng)分無明顯差異，兩組中除第1天外其余各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組相比均有顯著差異（P<0.05）。從3天起評(píng)分漸增，達(dá)高峰時(shí)間為2周并且維持至8周。齒狀回顆粒細(xì)胞上區(qū)

4、苔蘚纖維出芽評(píng)分為0～1分，且各時(shí)間點(diǎn)之間及與對(duì)照組之間比較無差異。對(duì)照組CA3區(qū)和齒狀回顆粒細(xì)胞上區(qū)苔蘚纖維出芽評(píng)分均僅0～1分，各時(shí)間點(diǎn)之間無差異。 （3）在對(duì)照組大鼠海馬齒狀回、門區(qū)、CA1和CA3區(qū)均有Racl、RhoA的表達(dá)，免疫陽性細(xì)胞主要在CA3區(qū)的錐體細(xì)胞和門區(qū)。 ①Racl的表達(dá)： PTZ組和干預(yù)組中Racl蛋白表達(dá)的變化趨勢(shì)基本一致（p<0.05）。與對(duì)照組比較，兩組中Racl在3天時(shí)表達(dá)開始

5、增加，2周時(shí)達(dá)高峰，4周和6周維持在較高水平，8周時(shí)表達(dá)有所下降，但仍高于對(duì)照組水平，p<0.05。 ②RhoA的表達(dá)： PTZ組和干預(yù)組中RhoA蛋白表達(dá)的變化趨勢(shì)基本一致（p<0.05），與對(duì)照組比較，兩組中RhoA在1周時(shí)表達(dá)開始增加，4周時(shí)達(dá)高峰，6周時(shí)維持在較高水平，8周時(shí)下降至接近1周水平，p<0.05。 結(jié)論：PTZ點(diǎn)燃大鼠海馬Racl和RhoA表達(dá)增加參與了苔蘚纖維出芽過程；法舒地爾對(duì)Racl和R