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1、動態(tài)觀察糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)mRNA和蛋白在戊四氮致癇大鼠海馬各區(qū)的表達變化,及其與苔蘚纖維出芽關(guān)系,以探討其在癲癇的發(fā)生發(fā)展中的作用。 方法: 清潔級SD雄性成年大鼠120只,隨機分兩大組:實驗組(60只)和對照組(60只);實驗組隨機分為PTZ(30mg/kg.d,腹腔注射)第一次注射后3 d、1w、2w、4w、6w共5個亞組,每亞組12只,對照組(等容量的NS,每天1次,腹腔注射)隨機分為5個亞組,
2、每亞組12只,與實驗組各時間點對應(yīng)。以上各亞組再分2個小組,每小組6只大鼠,分別進行①Timm染色并評分;②GSK-3β的免疫組化和原位雜交染色并測定其相應(yīng)的光密度值。 結(jié)果: 1.動物模型 PTZ致癇成功率為95.8%,死亡率為4.2%。PTZ點燃后大鼠出現(xiàn)癇性發(fā)作及腦電圖顯示癇樣放電;對照組未出現(xiàn)癇性發(fā)作及自發(fā)性發(fā)作。 2.GSK-3βmRNA和蛋白的表達變化 實驗組大鼠海馬CAl、CA3、D
3、G區(qū)GSK-3βmRNA和蛋白表達在點燃過程中逐漸增多,點燃后表達逐漸下調(diào)到正常對照組水平,在點燃前后除6w組外GSK-3β表達與對照組相應(yīng)時間點比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 3.苔蘚纖維出芽(MFS)Timm銀染顆粒評分 實驗組CA3區(qū)在點燃前可見1-4級MFS,點燃后可見4-5級MFS,與對照組相應(yīng)時間點比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義;實驗組齒狀回內(nèi)分子層可見0-1級MFS,與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 4.CA3區(qū)GSK
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