骨髓間充質(zhì)干細胞為藥物載體的腦膠質(zhì)瘤靶向治療可行性研究.pdf

1、利用間充質(zhì)干細胞(MSCs)向腫瘤組織遷移的特性，探討通過篩選的MSCs親和肽(P1)連接基質(zhì)金屬蛋白酶底物肽(P2)及藥物實現(xiàn)以MSCs為載體的靶向治療的可行性。 采用噬菌體肽庫技術(shù)，用分離培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞篩選噬菌體環(huán)七肽庫，最終獲得MSCs高親和性多肽。為了便于檢測，合成此親和性多肽(PI)及FITC與生物素(Biotin)標記的親和肽。在熒光顯微鏡下觀察可見FITC標記的親和肽與MSCs結(jié)合后，細胞表面呈現(xiàn)綠色熒

2、光。流式細胞儀檢測FITC標記多肽與MSCs的結(jié)合率為99．8％，熒光強度為陰性對照的29．7倍。酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測結(jié)果顯示，生物素標記親和肽(Bio-PD與MSCs的結(jié)合強度為空白對照的4．05倍，說明Bio-P1與MSCs具有良好的親和性。將MSC_Bio-P1植入裸鼠腫瘤組織旁側(cè)，4天后剪切腫瘤組織進行冰凍切片免疫組化分析，結(jié)果顯示MSCs陽性染色，說明生物素標記親和肽與MSCs在體內(nèi)有良好的親和性與穩(wěn)定性。 通過接種9

3、L膠質(zhì)瘤細胞建立了大鼠腦膠質(zhì)瘤模型，采用RT-PCR技術(shù)、免疫組織化學和明膠酶譜等方法檢測9L膠質(zhì)瘤細胞及腦膠質(zhì)瘤組織中明膠酶MMP-2和MMP-9的活性變化。結(jié)果顯示在膠質(zhì)瘤細胞及腫瘤組織中均可檢測到MMP-2和MMP-9的表達，且隨著腫瘤的生長，MMP-2和MMP-9的表達量逐漸增高。為MSCs在靶部位釋藥奠定了實驗基礎(chǔ)，同時為MM?s抑制劑的篩選提供了可參考的動物模型。 合成了FITC標記的親和肽與基質(zhì)金屬蛋白酶底物肽(P