間充質(zhì)干細胞（MSCs）對神經(jīng)膠質(zhì)瘤趨化能力研究.pdf

1、目的:該實驗以立體定向技術(shù)建立C6大鼠膠質(zhì)瘤模型;分離培養(yǎng)并建立穩(wěn)定增殖的人臍血間充質(zhì)干細胞(MSCs)株系,利用流式細胞技術(shù)鑒定其表面抗原,誘導(dǎo)分化證明其分化潛能;應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察MSCs對膠質(zhì)瘤組織的趨化能力及分布規(guī)律,為以MSCs為細胞載體的靶向治療提供實驗依據(jù).方法:從健康足月新生兒臍血中分離出間充質(zhì)干細胞加以培養(yǎng),以多種抗體標記其表面抗原,用流式細胞儀檢測,并行體外誘導(dǎo)分化實驗,確定所獲細胞是間充質(zhì)干細胞.借助立體定向

2、儀在大鼠腦組織內(nèi)定點注射C6大鼠膠質(zhì)瘤細胞,建立膠質(zhì)瘤模型.模型建立七天后,再次在立體定向儀的指示下,在模型鼠腦組織中輸注預(yù)先用BrdU標記的人間充質(zhì)干細胞.按注入位置分為原位組、同側(cè)半球組和同側(cè)腦室組.六至八天后,處死大鼠,灌注固定后取腦.進一步制作成石蠟切片,以蘇木素伊紅(H.E.)染色確定膠質(zhì)瘤組織的范圍.相鄰切片采用免疫組織化學(xué)方法(ABC法)顯示標有BrdU的MSCs,觀察其在膠質(zhì)瘤組織和周圍正常腦組織中的分布規(guī)律.結(jié)果:1、