NF-κB Decoy寡核苷酸對小鼠DSS結腸炎的影響.pdf

1、目的:潰瘍性結腸炎(Ulcerativecolitis，UC)是一種病因和發(fā)病機制至今不明的慢性非特異性的結腸炎癥。因此，其治療缺乏特異有效的藥物，是目前臨床上的一大難題。傳統(tǒng)的藥物如柳氮磺胺吡啶(SASP)和糖皮質激素不僅療效欠佳，而且副作用也較大，嚴重地影響了其廣泛應用。故尋找有效治療UC的新型藥物是目前UC研究領域的一個熱點。 本研究將探討NF-κBDecoyODN對葡聚糖硫酸鈉(Dextransulphatesodium

2、，DSS)結腸炎的影響，為尋找一種新的，具有開發(fā)潛力的治療UC的新藥提供實驗依據(jù)。 材料與方法:將36只雌性BALB/C小鼠隨機分為4組：①正常對照組；②DSS+NF-κBDecoyODN組；③DSS+錯義NF-κBDecoyODN組；④DSS+生理鹽水組。采用以下方法進行研究：(1)測定各組小鼠血清中BUN、CREA、GLU、ALT、AST濃度。(2)取各小鼠左半結腸組織分別進行大體及HE染色觀察結腸組織形態(tài)學改變。(3)免疫

3、組織化學染色觀察NF-κBp65在結腸粘膜細胞內的表達。(4)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)測定結腸粘膜組織中TNF-α的含量。(5)共聚焦顯微鏡(LSCM)觀測5'末端FITC標記的NF-κBDecoyODN在腸粘膜內的分布情況。 結果: 1.5％DSS處理的三組小鼠其DAI評分均明顯高于正常對照組(P＜0.05)；而NF-κBDecoyODN組其DAI評分明顯低于錯義NF-κBDecoyODN組和生理鹽水組(P＜0.

4、001)。 2.5％DSS處理的三組小鼠其組織學評分均明顯高于正常對照組(P＜0.05)，而NF-κBDecoyODN組其組織學評分明顯低于錯義NF-κBDecoyODN組和生理鹽水組(P＜0.001) 3.5％DSS處理的三組小鼠其腸粘膜組織內TNF-α表達均明顯高于正常對照組(P＜0.05)，而NF-κBDecoyODN組腸粘膜組織內TNF-α表達明顯低于錯義NF-κBDecoyODN組和生理鹽水組(P＜0.05)。

5、 4.5％DSS處理的三組小鼠其腸粘膜組織NF-κBp65的表達以胞核為主，而且這三組間NF-κBp65胞核表達無顯著差別。相反，正常對照組小鼠NF-κBp65以胞漿表達為主，且其胞漿表達明顯高于DSS處理的三組小鼠。 5.共聚焦顯微鏡(LSCM)觀察顯示，5'末端FITC標記的NF-κBDecoyODN可有效進入結腸粘膜層和粘膜下層組織。 6.各實驗組小鼠肝、腎功能及血糖無顯著差異。 結論: NF-κB