血管性癡呆大鼠的病理改變及炎性機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 本研究采用永久性結(jié)扎大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈的方法來(lái)建立血管性癡呆的模型，觀察血管性癡呆的病理改變，并探討其發(fā)病機(jī)制。 方法： 通過(guò)永久性結(jié)扎大鼠的雙側(cè)頸總動(dòng)脈導(dǎo)致前腦缺血建立血管性癡呆動(dòng)物模型，以Moms水迷宮試驗(yàn)檢測(cè)大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。采用組織病理染色、TUNEL染色、免疫組織化學(xué)、ELISA、RT-PCR等方法，動(dòng)態(tài)觀察了各組大鼠在缺血后1天、3天、7天、14天、1月、2月、3月、4月的腦組織病理演變，并觀察了血及腦組

2、織中的炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，探討了炎性細(xì)胞因子在血管性癡呆發(fā)病中的可能作用。 結(jié)果： 1、動(dòng)物行為學(xué)改變 雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎后7天，神經(jīng)病學(xué)與卒中指數(shù)二項(xiàng)指標(biāo)均接近正常，無(wú)運(yùn)動(dòng)障礙。術(shù)后1月時(shí)模型組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力比對(duì)照組明顯下降，隨缺血時(shí)間的延長(zhǎng)，大鼠學(xué)習(xí)記憶能力減退越明顯，4個(gè)月時(shí)最明顯。 2、組織病理改變 缺血早期主要的病理變化發(fā)生在基底前腦、海馬、顳葉皮質(zhì)及視束，可見(jiàn)神經(jīng)元變性、水腫、壞死及丟失，部分出現(xiàn)小的梗

3、死灶。小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)明顯，并貫串于缺血的全部過(guò)程。缺血1個(gè)月后，白質(zhì)改變逐漸明顯，表現(xiàn)為髓鞘脫失、間質(zhì)疏松呈空泡樣改變。隨缺血時(shí)間的延長(zhǎng)脫髓鞘改變加重，以胼胝體及腦室周圍白質(zhì)明顯，神經(jīng)軸索連續(xù)性完好。免疫組化染色證實(shí)多種炎性細(xì)胞因子高表達(dá)，缺血早期以基底前腦、海馬、顳葉皮質(zhì)及視束等部位多見(jiàn)，部分炎性細(xì)胞圍繞小靜脈形成袖套樣改變。后期以白質(zhì)的炎癥反應(yīng)最為顯著，見(jiàn)于腦室周圍白質(zhì)、胼胝體等區(qū)域。TUNEL染色未觀察到凋亡細(xì)胞。

4、 3、ELISA TNF-α及IL-1β在大鼠腦組織及血清中的表達(dá)均出現(xiàn)兩次升高，IL-8在腦組織及血清中的表達(dá)僅出現(xiàn)一次高峰，且組織中蛋白的表達(dá)滯后于血清中的表達(dá)，但組織中蛋白的表達(dá)量遠(yuǎn)高于血清中的蛋白量。 4、RT-PCR：NF-KBp65 mRNA在缺血后3天表達(dá)即增加，缺血7天時(shí)到達(dá)高峰，隨后逐漸下降；ICAM-1在缺血后3天表達(dá)最高，隨后逐漸下降，在缺血3月時(shí)表達(dá)再次升高。 結(jié)論： 1、采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈