卡托普利與氯沙坦對血管性癡呆大鼠的作用及機制研究.pdf

1、目的：分別觀察腎素-血管緊張素系統(tǒng)抑制藥卡托普利和氯沙坦對血管性癡呆(VD)模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶的改善及治療效果,并初步探討其可能作用機制。方法：選取50只SD雄性大鼠,隨機取60只,采用永久性結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈法的改良方法—不同時點分別永久性結(jié)扎大鼠左、右側(cè)頸總動脈法建立VD模型。術(shù)后4周通過Morris水迷宮對制模大鼠進行學(xué)習(xí)記憶能力的測定,篩選出學(xué)習(xí)記憶能力明顯障礙大鼠,制模不合格大鼠剔除,模型制備成功36只大鼠,隨機分為卡托普利組(

2、卡托普利,2.5 mg/Kg)、氯沙坦組(氯沙坦,2.0 mg/Kg)、模型組(生理鹽水)每組10只,和假手術(shù)組(生理鹽水)12只。灌胃給予相應(yīng)藥物,1次/d,持續(xù)4周。給藥4周后,再次應(yīng)用Morris水迷宮實驗檢測各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。大鼠學(xué)習(xí)記憶能力測定后,腹主動脈取血用于檢測血流變學(xué)指標(biāo);每組部分大鼠斷頭取腦分離皮質(zhì)和海馬并用生理鹽水(NS)制備10％組織勻漿用于測定生化指標(biāo)等;部分大鼠給予4％多聚甲醛灌注,用TUNEL法檢測海馬

3、神經(jīng)元凋亡及病理學(xué)情況。用免疫組織化學(xué)法檢測其Bcl-2及Bax蛋白表達情況;采用放射免疫法測定腦組織 TNF-α、IL-1β含量;采用羥胺法測定腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性;硫代巴比妥酸(TBA)法測定腦組織中丙二醛(MDA)含量;硝酸還原酶法測定腦組織中NO含量;化學(xué)比色法測定腦組織中NOS和AchE活性。血液流變學(xué)指標(biāo)采用全自動血流變快測儀測定。結(jié)果：手術(shù)后4周:①定位航行實驗:隨著訓(xùn)練次數(shù)的增加,各組大鼠平均逃避潛伏期均

4、縮短。與假手術(shù)組比較,手術(shù)組大鼠逃避潛伏期均明顯延長(P<0.05)。②空間搜索實驗:與假手術(shù)組比較,模型組在120s內(nèi)穿越平臺的次數(shù)明顯減少(P<0.05)。藥后4周:①定位航行實驗:經(jīng)過5天水迷宮訓(xùn)練,大鼠逃避潛伏期,卡托普利和氯沙坦治療組與模型組比較明顯縮短(P<0.05);②空間搜索實驗:120s內(nèi)穿越平臺的次數(shù)卡托普利和氯沙坦治療組與模型組比較均有明顯增多(P<0.05)。卡托普利組和氯沙坦組大鼠海馬凋亡神經(jīng)元分別為(11.3

5、4±2.14)％和(15.22±2.41)％,比模型組(39.24±5.47)％明顯減少(P<0.05);Bcl-2及Bax蛋白表達,卡托普利組和氯沙坦組分別為(23.41±2.17)％和(9.47±3.11)％及(21.53±2.73)％和(11.26±2.56)％,比假手術(shù)組(5.21±1.14)％和(3.61±1.55)明顯增加(P<0.05),而較模型組(20.08±3.17)％和(28.93±3.68)％有明顯改善。卡托普利組

6、和氯沙坦組腦皮質(zhì) SOD活性(132.89±2.12)U/mgprot和(134.43±3.36) U/mgprot,較模型組(116.19±2.11)U/mgprot有明顯升高;卡托普利組和氯沙坦組腦海馬SOD活性(126.29±6.41)U/mgprot和(128.63±4.79) U/mgprot,較模型組(103.78±6.03)U/mgprot也有明顯升高。MDA含量卡托普利組和氯沙坦組在腦皮質(zhì)由模型組(7.44±0.81)n

7、mol/mgprot分別降為(3.75±0.50)nmol/mgprot和(3.99±0.75)nmol/mgprot;在海馬由模型組(7.01±0.86)nmol/mgprot分別降為(3.92±0.57) nmol/mgprot和(3.63±0.43)nmol/mgprot。卡托普利組和氯沙坦組腦皮質(zhì)NOS活力(0.37±0.14)U/mgprot和(0.37±0.07)U/mgprot,較模型組(1.03±0.05)U/mgpro

8、t有明顯降低;卡托普利組和氯沙坦組腦海馬NOS活力(0.35±0.11)U/mgprot和(0.36±0.11)U/mgprot,較模型組(1.00±0.10)U/mgprot也有明顯降低。NO含量卡托普利組和氯沙坦組在腦皮質(zhì)由模型組(4.99±0.54)μmol/gprot分別降為(3.02±0.45)μmol/gprot和(2.96±0.21)μmol/gprot;在海馬NO含量由模型組(5.03±0.52)μmol/gprot分別

9、降為(3.06±0.42)μmol/gprot和(3.19±0.35)μmol/gprot。卡托普利和氯沙坦對大鼠皮質(zhì) TNF-α含量由模型組(3.48±0.49)ng/ml分別降為(2.21±0.32)ng/ml和(2.25±0.34) ng/ml;海馬 TNF-α含量由模型組(5.01±0.80)ng/ml分別降為(2.82±0.51)ng/ml和(3.08±0.47)ng/ml?？ㄍ衅绽吐壬程箤Υ笫笃べ|(zhì)IL-1β含量由模型組(0

10、.45±0.04)ng/ml分別降為(0.34±0.04)ng/ml和(0.27±0.05)ng/ml;海馬IL-1β含量由模型組(0.45±0.04)ng/ml分別降為(0.28±0.05)ng/ml和(0.25±0.01)ng/ml。卡托普利和氯沙坦對大鼠海馬AchE活性由模型組(0.69±0.27)U/mgprot分別降為(0.44±0.12)U/mgprot和(0.45±0.10)U/mgprot。與模型組比較,卡托普利與氯沙坦

11、組大鼠全血黏度的低切、中切和血漿黏度有顯著性降低(P<0.05),對血液流變學(xué)具有一定改善作用。結(jié)論：卡托普利及氯沙坦具有改善VD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的作用。該作用可能通過減少海馬神經(jīng)元凋亡,影響B(tài)cl-2及Bax蛋白表達,抑制腦組織 AchE活性,減少 Ach的降解有關(guān);亦與增加SOD活性增強氧自由基的清除,降低NOS活性,減少NO的含量,減輕氧自由基和NO對腦組織的損害有關(guān);此外,還與通過影響腦組織TNF-α和IL-1β含量,改善血