飛蝗幾丁質(zhì)酶基因的功能研究.pdf

1、T h e s i sf o r M a s t e r ’S d e g r e e ，S h a n x i U n i v e r s i t y ，2 0 1 1T h e f u n c t i o n so f c h i t i n a s eg e n e sf r o m L o c u s t am i g r a t o r i aS t u d e n tN a m e D a —q iL iS u p e r

2、v i s o rM a j o rS p e c i a l t yA s s o c i a t e P r o f ．J i a n —z b e nZ h a n gP r o f ．Y jS u nZ o o l o g yA n i m a lB i o c h e m i s t r y a n dM o l e c u l a r B i o l o g yD e p a r t m e n t C o l l e g

3、eo f L i f eS c i e n c eR e s e a r c hD u r a t i o n 2 0 0 8 ．0 9 ．2 0 1 1 ．0 6J u n e ，2 0 1 13 ．2 ．1 ．2 I 認(rèn)C E e D N A 模板的合成?????????????????????1 83 ．2 ．1 ．3 擴(kuò)增幾丁質(zhì)酶基因L m C h t l O e D N A 的引物設(shè)計(jì)????????????1 83 ．2 ．

4、1 ．4 幾丁質(zhì)酶基因L m C h t l O e D N A 的擴(kuò)增????????????????】83 ．2 ．1 ．5 目標(biāo)片段測(cè)序??????????????????????????1 93 ．2 ．1 ．6 序列分析????????????????????????????1 93 ．2 ．1 ．7 序列拼接與驗(yàn)證?????????????????????????1 93 ．2 ．2 L m C h t l 0 結(jié)構(gòu)域分析及

5、聚類樹的構(gòu)建????????????????．．1 93 ．2 ．3 幾丁質(zhì)酶基因L m C h t l O 在5 齡飛蝗的時(shí)空表達(dá)特性??????????2 03 ．2 ．3 ．1 5 齡不同天數(shù)飛蝗c D N A 模板制備及差異表達(dá)分析??????????2 03 ．2 ．3 ．2 飛蝗5 齡第6 天不同組織部位c D N A 模板制備及差異表達(dá)檢測(cè)?????2 03 ．3 結(jié)果與分析????????????????????????

6、????．2 03 ．3 ．1 幾丁質(zhì)酶基因L m C h t l O e D N A 片段的擴(kuò)增及拼接???????????一2 03 ．3 ．2 幾丁質(zhì)酶基因L m C h t l O 的氨基酸序列分析??????????????．2 13 ．3 ．3 幾丁質(zhì)酶L m C h t l 0 的聚類分析???????????????????．2 33 ．3 ．4 幾丁質(zhì)酶基因L m C h t l O 在5 齡飛蝗的時(shí)空表達(dá)特性分析??

7、??????2 53 ．4 討論?????????????????????????????????????????一2 6第四章飛蝗幾丁質(zhì)酶基因L m C h t l O 的生物學(xué)功能研究???????????2 94 ．1 材料與試劑????????????????????????????．2 94 ．】．1 實(shí)驗(yàn)材料????????????????????????????一2 94 ．1 ．2 試劑與儀器??????????????

8、?????????????．．2 94 ．2 實(shí)驗(yàn)方法?????????????????????????????．2 94 ．2 ．1 L m C h t l O d s R N A 的體外合成????????????????????．2 94 ．2 ．1 ．1 L m C h t l O d s R N A 引物設(shè)計(jì)????????????????????一2 94 - 2 ．1 ．2 c D N A 模板的合成???????????

9、?????????????3 04 ．2 ．1 ．3 d s R N A 的體外合成???????????????????????一3 04 ．2 ．2 d s R N A 的注射與觀察???????????????????????．3 04 ．2 ．2 ．1 同一基因不同位置合成d s R N A 的沉默效率檢測(cè)???????????．3 04 ．2 ．2 ．2 飛蝗不同齡期d s L m C h t l O 一2 的干擾研究????