刺五加關節(jié)腔注射干預兔膝骨性關節(jié)炎的實驗研究.pdf

1、目的：探討刺五加關節(jié)腔注射治療原發(fā)性膝關節(jié)骨性關節(jié)炎的作用機制。 方法：進行實驗研究，64只新西蘭白兔隨機分為4組(每組16只)，16只不造模作為正常組，其余48只用內側半月板部分切除的方法造模，最后分為正常組、刺五加組、透明質酸鈉組，模型組，正常組既不造模也不給藥，刺五加組給予刺五加注射液0.5ml/只術側關節(jié)腔注射，透明質酸鈉組給予0.3ml/只術側關節(jié)腔注射，模型組只造模。術后2周開始用藥干預，直到處死前1周。分6周和10

2、周兩個時相點采集血清和關節(jié)液，測定血液和關節(jié)滑液中NO、iNOs、SOD、MDA水平。同樣，分兩個時相點處死動物取材，肉眼觀察關節(jié)軟骨及滑膜，骨贅和軟骨潰瘍，拍膝關節(jié)X線片，觀察軟骨下骨的硬化情況。制備軟骨及滑膜石蠟切片HE及AB—PAS染色，對軟骨和滑膜分別在光鏡下進行病理評分。用末端原位標記檢測軟骨細胞凋亡狀況，免疫組化法檢測bcl-2在軟骨中的表達，并檢測尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)在滑膜上的表達。 結果：正常組關節(jié)面

3、光滑有光澤，軟骨透明，無明顯缺損和新生物，滑膜無充血。6周時，可見刺五加組和HA膝關節(jié)有輕度病變，模型組病變較前者稍重。10周時，模型組關節(jié)面不光滑，無光澤，軟骨不透明，有明顯缺損和新生物，滑膜色暗充血腫脹；刺五加組軟骨色澤較暗，可見潰瘍形成較表淺，透明度差，有少到中等量骨贅形成．透明質酸鈉組關節(jié)面見潰瘍生成較表淺，滑膜腫脹，骨贅形成較多。隨時間增長病變有加重的趨勢，病理學評分分值增高。X線檢查顯示手術3組動物在6周時內側關節(jié)間隙狹窄，

4、脛骨平臺軟骨下骨密度輕微增高，可有少許骨贅生成；10周時上述變化更加明顯。HE及AB—PAS染色可見：除正常組外，軟骨的完整性均不同程度的遭到破壞。AB—PAS不同程度的基質失染，表示各手術造模組蛋白多糖有不同程度的丟失。還可見軟骨中不同程度的新生血管和纖維化變，其中以模型組最嚴重，且10周組較6周組病變嚴重。6周時模型組血清及滑液中的NO較正常組有明顯的升高(P＜0.05)，刺五加組和HA組的NO值無明顯升高(P＞0.05)，HA組和

5、模型組iNOs較正常組有所升高(P＜0.05)，刺五加組未見明顯變化(P＞0.05)，HA組iNOs較刺五加組上升明顯(P＜0.05)。各手術造模組的SOD較正常組都有明顯的降低(P＜0.05)，各手術造模組MDA較正常組有明顯增高。10周時各手術造模組的血清及關節(jié)滑液中的NO、iNOs、MDA水平較正常組有明顯的升高，以模型組升高最明顯(P＜0.05)。HA組NO水平較刺五加組上升明顯(P＜0.05)。各手術造模組的SOD水平較正常組

6、有明顯的降低(P＜0.05)，刺五加組SOD水平又高于HA組(P＜0.05)。HA組MDA和iNOS水平似乎略高于刺五加組，但是無統計學意義。6周與10周兩個時相點相比較，血清和關節(jié)滑液中的NO、iNOS及MDA水平有較明顯的上升趨勢(P＜0.05)，SOD水平有明顯的下降趨勢(P＜0.05)。兩個時相點，刺五加組和HA組的凋亡率低于模型組(P＜0.05)，bcl-2的表達高與模型組(P＜0.05)，刺五加組與HA組之間無差別(p＞0.

7、05)。在6周時，手術造模各組滑膜中uPA表達強于正常組(P＜0.05)，其中HA組和刺五加組的表達要弱于模型組(P＜0.05)。到10周時，HA組、刺五加組和正常組uPA表達較6周時未見明顯變化，只有模型組的可以見有增加趨勢但不具有統計學意義。 結論：刺五加注射液可以減緩實驗性兔膝關節(jié)骨性關節(jié)炎的病程進展，其機理可能是： 1、刺五加注射液通過對滑膜與軟骨兩個途徑減緩關節(jié)退變。 2、刺五加有可能通過其活血化瘀，免