吉富羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌后的病理觀察及免疫酶活性變化研究.pdf

1、羅非魚(yú)是中國(guó)淡水養(yǎng)殖的重要品種，主要在廣東、海南、廣西、云南及福建等省份養(yǎng)殖。近年來(lái)由于規(guī)模化養(yǎng)殖模式的推廣和養(yǎng)殖環(huán)境惡化，導(dǎo)致病害頻發(fā)，其中以無(wú)乳鏈球菌病的危害最大。目前尚無(wú)報(bào)道羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌的途徑及侵染靶器官。開(kāi)展羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌后的動(dòng)態(tài)病理學(xué)及免疫酶活性變化研究工作，可以為更深入研究無(wú)乳鏈球菌的致病機(jī)理和防控藥物研發(fā)提供理論依據(jù)。本研究采用注射、灌胃、浸泡三種方式對(duì)吉富羅非魚(yú)進(jìn)行無(wú)乳鏈球菌(HN016菌株)感染，觀察三種

2、方式感染后病原菌在吉富羅非魚(yú)體內(nèi)的分布規(guī)律及病理變化，同時(shí)研究不同種群羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌后血液及肝臟組織中免疫相關(guān)酶的變化規(guī)律。主要結(jié)論如下:(1)采用注射、灌胃、浸泡三種方式對(duì)吉富羅非魚(yú)進(jìn)行人工感染，其中注射和灌胃均出現(xiàn)典型的無(wú)乳鏈球菌病臨床癥狀，注射組的死亡周期最短，感染后12h出現(xiàn)死魚(yú)，感染后24h出現(xiàn)死亡高峰，死亡率最高，達(dá)到92.5％;灌胃組感染后5h出現(xiàn)死魚(yú)，感染后48h出現(xiàn)死亡高峰，死亡率為90％;而浸泡組感染后僅出現(xiàn)輕

3、微發(fā)病癥狀，沒(méi)有出現(xiàn)死魚(yú)。(2)在吉富羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌后體內(nèi)病原菌分離方面，注射組和灌胃組感染后2h在脾臟、肝臟、前腎、胃、腮、皮膚和肌肉組織中均可分離出病原菌，感染后5h在兩組的腦組織中均可分離出病原菌，感染后8h兩組均已表現(xiàn)出明顯的發(fā)病癥狀，此時(shí)體內(nèi)各組織的病原菌濃度達(dá)到峰值;而浸泡組感染后8h才在體內(nèi)各組織中分離出病原菌，但它們的濃度均低于相同時(shí)期的注射組和灌胃組。(3)對(duì)吉富羅非魚(yú)進(jìn)行注射、灌胃、浸泡三種方式感染無(wú)乳鏈球菌，

4、取感染后2h、5h、8h、12h、24h的鰓、腸、脾臟、肝臟組織進(jìn)行蘇木精-伊紅染色法（H.E染色法）染色及免疫組織化學(xué)定位。H.E染色結(jié)果顯示:三種方式在感染后早期(2-5h)鰓、肝臟、脾臟、腸組織均已經(jīng)出現(xiàn)明顯病變，其中鰓表現(xiàn)為基部上皮細(xì)胞增生及鰓小片壞死，脾臟為含鐵血黃素增多、巨噬細(xì)胞彌漫性浸潤(rùn)以及血管變細(xì)，肝臟為出現(xiàn)空泡變性、毛細(xì)血管破裂，腸為腸絨毛斷裂、黏膜下層細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞;三種方式的病變程度依次為注射組＞灌胃組＞浸泡組。免

5、疫組化定位結(jié)果顯示:灌胃感染后病原菌強(qiáng)陽(yáng)性信號(hào)先在腸組織出現(xiàn)，注射組為脾臟組織，浸泡組為鰓組織。(4)采用腹腔注射方式對(duì)吉富羅非魚(yú)抗病選育系、百桂品系吉富羅非魚(yú)及奧尼羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌（HN016菌株），分析感染后三種羅非魚(yú)血液及肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)、總抗氧化能力(T-AOC)等免疫相關(guān)酶活性變化。結(jié)果顯示:三個(gè)不同種群羅非魚(yú)肝臟組織ACP、AKP、LZM、SOD