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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察熟地黃多糖對(duì)左旋谷氨酸鈉(L-Glutamicacidsodiumsalt,MSG)損毀下丘腦弓狀核大鼠焦慮行為及海馬蛋白質(zhì)組的影響,評(píng)價(jià)熟地黃多糖的抗焦慮作用,探討熟地黃多糖抗焦慮作用的機(jī)制。
方法:選取普通級(jí)SD大鼠50只,34雌16雄,作為種鼠供實(shí)驗(yàn)室繁殖。取雄性新生鼠40只隨機(jī)分為對(duì)照組、MSG模型組、地西泮組、熟地黃多糖低劑量組和熟地黃多糖高劑量組,每組8只。分別于出生后第2、4、6、8、10天進(jìn)行皮下注射
2、MSG4mg/g,對(duì)照組皮下注射等體積的生理鹽水,每日1次。28天后離乳,再飼養(yǎng)4周,于第9周的第1天開(kāi)始,地西泮組給予1mg/kg地西泮片混懸液,熟地黃多糖高、低劑量組分別給予400mg/kg、200mg/kg熟地黃多糖水溶液,對(duì)照組和MSG模型組給予等體積飲用水,均連續(xù)灌胃4周,每日1次,灌胃體積均為1mL/100g。分別于第9、10、11、12周的最后1天給藥1小時(shí)后,以高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)和明暗箱實(shí)驗(yàn)觀察大鼠焦慮行為狀態(tài)。行為學(xué)測(cè)試
3、結(jié)束后,立即取腦,分離海馬組織,提取海馬組織蛋白質(zhì)。將對(duì)照組、MSG模型組和熟地黃多糖高劑量組進(jìn)行雙向凝膠電泳(Two-dimensionalgelelectrophoresis,2-DE),通過(guò)比較對(duì)照組和MSG模型組以及MSG模型組和熟地黃多糖高劑量組大鼠海馬蛋白質(zhì)的2-DE譜圖,尋找MSG損毀下丘腦弓狀核導(dǎo)致焦慮行為的差異表達(dá)的蛋白點(diǎn)和熟地黃多糖干預(yù)后的差異表達(dá)的蛋白點(diǎn)。
結(jié)果:①第9周,與對(duì)照組比較,MSG模型組開(kāi)臂滯
4、留時(shí)間及開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)百分比及明暗箱穿箱次數(shù)均顯著減少(P<0.01);與MSG模型組比較,地西泮組和熟地黃多糖低劑量組顯著增加MSG大鼠開(kāi)臂滯留時(shí)間百分比及明暗箱穿箱次數(shù)(P<0.01),增加開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)百分比(P<0.05);熟地黃多糖高劑量組顯著增加MSG大鼠開(kāi)臂滯留時(shí)間及開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)百分比及明暗箱穿箱次數(shù)(P<0.01)。②第9至12周,與MSG模型組比較,熟地黃多糖高劑量組均顯著增加MSG大鼠開(kāi)臂滯留時(shí)間及開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)百分比(P
5、<0.01,P<0.05);并在第9、第10周,顯著增加MSG大鼠明暗箱穿箱次數(shù)(P<0.01,P<0.05);③獲得了高重復(fù)性和高分辨率的大鼠海馬蛋白質(zhì)2-DE譜圖。通過(guò)比較對(duì)照組和MSG模型組的海馬蛋白表達(dá)譜,發(fā)現(xiàn)4個(gè)差異蛋白點(diǎn),其表達(dá)均為下調(diào);通過(guò)比較MSG模型組和熟地黃多糖高劑量組的海馬蛋白表達(dá)譜,發(fā)現(xiàn)10個(gè)差異蛋白點(diǎn),其中3個(gè)蛋白點(diǎn)表達(dá)上調(diào),7個(gè)蛋白點(diǎn)表達(dá)下調(diào)。
結(jié)論:①M(fèi)SG損毀下丘腦弓狀核模型可以導(dǎo)致焦慮的發(fā)生;
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