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文檔簡介
1、目的:觀察熟地黃多糖對左旋谷氨酸鈉(L-Glutamicacidsodiumsalt,MSG)損毀下丘腦弓狀核大鼠焦慮行為及海馬蛋白質(zhì)組的影響,評價熟地黃多糖的抗焦慮作用,探討熟地黃多糖抗焦慮作用的機制。
方法:選取普通級SD大鼠50只,34雌16雄,作為種鼠供實驗室繁殖。取雄性新生鼠40只隨機分為對照組、MSG模型組、地西泮組、熟地黃多糖低劑量組和熟地黃多糖高劑量組,每組8只。分別于出生后第2、4、6、8、10天進行皮下注射
2、MSG4mg/g,對照組皮下注射等體積的生理鹽水,每日1次。28天后離乳,再飼養(yǎng)4周,于第9周的第1天開始,地西泮組給予1mg/kg地西泮片混懸液,熟地黃多糖高、低劑量組分別給予400mg/kg、200mg/kg熟地黃多糖水溶液,對照組和MSG模型組給予等體積飲用水,均連續(xù)灌胃4周,每日1次,灌胃體積均為1mL/100g。分別于第9、10、11、12周的最后1天給藥1小時后,以高架十字迷宮實驗和明暗箱實驗觀察大鼠焦慮行為狀態(tài)。行為學測試
3、結(jié)束后,立即取腦,分離海馬組織,提取海馬組織蛋白質(zhì)。將對照組、MSG模型組和熟地黃多糖高劑量組進行雙向凝膠電泳(Two-dimensionalgelelectrophoresis,2-DE),通過比較對照組和MSG模型組以及MSG模型組和熟地黃多糖高劑量組大鼠海馬蛋白質(zhì)的2-DE譜圖,尋找MSG損毀下丘腦弓狀核導致焦慮行為的差異表達的蛋白點和熟地黃多糖干預后的差異表達的蛋白點。
結(jié)果:①第9周,與對照組比較,MSG模型組開臂滯
4、留時間及開臂進入次數(shù)百分比及明暗箱穿箱次數(shù)均顯著減少(P<0.01);與MSG模型組比較,地西泮組和熟地黃多糖低劑量組顯著增加MSG大鼠開臂滯留時間百分比及明暗箱穿箱次數(shù)(P<0.01),增加開臂進入次數(shù)百分比(P<0.05);熟地黃多糖高劑量組顯著增加MSG大鼠開臂滯留時間及開臂進入次數(shù)百分比及明暗箱穿箱次數(shù)(P<0.01)。②第9至12周,與MSG模型組比較,熟地黃多糖高劑量組均顯著增加MSG大鼠開臂滯留時間及開臂進入次數(shù)百分比(P
5、<0.01,P<0.05);并在第9、第10周,顯著增加MSG大鼠明暗箱穿箱次數(shù)(P<0.01,P<0.05);③獲得了高重復性和高分辨率的大鼠海馬蛋白質(zhì)2-DE譜圖。通過比較對照組和MSG模型組的海馬蛋白表達譜,發(fā)現(xiàn)4個差異蛋白點,其表達均為下調(diào);通過比較MSG模型組和熟地黃多糖高劑量組的海馬蛋白表達譜,發(fā)現(xiàn)10個差異蛋白點,其中3個蛋白點表達上調(diào),7個蛋白點表達下調(diào)。
結(jié)論:①MSG損毀下丘腦弓狀核模型可以導致焦慮的發(fā)生;
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