IL-2和熟地黃多糖作為宮頸癌疫苗佐劑的效果初步研究.pdf

1、目的：在表達(dá)人乳頭瘤病毒16型（HPV16）E6、E7、ras基因轉(zhuǎn)化的TC-1小鼠宮頸癌治療模型中，以表達(dá)細(xì)胞因子白介素-2（IL-2）的重組非復(fù)制型痘苗病毒RNTV1175IL2H6LacZ和熟地黃多糖（RGP）分別作為佐劑與表達(dá)HPV16特異性靶抗原E6和E7的重組復(fù)制型痘苗病毒 RVVJHPV16E7E6對小鼠進(jìn)行聯(lián)合免疫，來探索IL-2和熟地黃多糖作為佐劑分別與宮頸癌疫苗聯(lián)用時的抗宮頸癌作用，為宮頸癌的預(yù)防與治療提供新的途徑。

2、
　　方法：(1)構(gòu)建和鑒定可表達(dá)IL-2的RNTV1175IL2H6LacZ，并對其體外表達(dá) IL-2生物活性進(jìn)行檢測；(2)腹腔注射RNTV1175IL2H6LacZ與RVVJHPV16E7E6混合物對小鼠進(jìn)行聯(lián)合免疫，檢測其體內(nèi)特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)及血清中 IL-2的水平，同時通過構(gòu)建TC-1小鼠宮頸癌治療模型來觀察該聯(lián)合免疫的抗腫瘤功效；(3)以灌胃RGP與肌肉注射RVVJHPV16E7E6方式對小鼠進(jìn)行聯(lián)合免疫，檢測其體內(nèi)

3、特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)、體液免疫反應(yīng)及血清中CD4+、CD8+水平，同樣通過TC-1小鼠宮頸癌治療模型來觀察該聯(lián)合免疫的抗腫瘤功效。
　　結(jié)果：(1)PCR結(jié)果證實 RNTV1175IL2H6LacZ被成功構(gòu)建。該病毒在CEF細(xì)胞中能維持IL-2基因穩(wěn)定遺傳至12代。Western Blot結(jié)果表明該病毒表達(dá)的IL-2蛋白分子與標(biāo)準(zhǔn)品 IL-2一致，且 MTT法測得其體外表達(dá)的IL-2生物活性單位值可達(dá)8.79IU/ml；(2)以RN

4、TV1175IL2H6LacZ作為佐劑的RVVJHPV16E7E6聯(lián)合免疫具有增強(qiáng)小鼠產(chǎn)生E7特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)的趨勢，可使血清中IL-2水平升高，并通過推遲成瘤時間和延緩腫瘤生長速度使小鼠的成瘤率降低30％；(3)以RGP作為佐劑的RVVJHPV16E7E6聯(lián)合免疫未能增強(qiáng)小鼠產(chǎn)生E7特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)和提高體液免疫水平，也不影響小鼠體內(nèi)CD4+數(shù)目、CD8+數(shù)目以及CD4+/CD8+的比值，但對小鼠的腫瘤保護(hù)率達(dá)90%。