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文檔簡介
1、目的:通過建立肺動脈高壓(Pulmonary artery hypertension,PAH)大鼠模型,觀察骨髓間充質干細胞膜微粒(Bone marrow mesenchymal stem cells-derived microp-articles,BMSCs-MP)對PAH的治療作用。
方法:⑴取2周齡清潔級SD大鼠的骨髓,進行骨髓間充質干細胞的原代分離培養(yǎng)。通過流式細胞學分析其表面標記,以及分化功能實驗鑒定其成骨和成脂
2、肪能力。在低營養(yǎng)條件下培養(yǎng)MSCs,誘導細胞釋放MP。將培養(yǎng)上清液超速離心后收獲MP,測定MP的蛋白濃度,并通過流式細胞儀分析其表面標志物,以及透射電鏡觀察其結構,對收獲的MP進行鑒定。⑵選健康的SD大鼠隨機分成四組:正常對照組(N組)、肺動脈高壓不干預組(PAH組)、骨髓間充質干細胞干預組(MSC組)以及間充質干細胞膜微粒干預組(MP組)。PAH模型的構建:通過一次性腹腔注射野百合堿(MCT)50mg/Kg,N組經腹腔注射相等體積的生
3、理鹽水。在造模后3周:MSC組通過尾靜脈一次性注射1×106個MSCs; MP組通過尾靜脈注射,30μg/只的MP,隔日注射,持續(xù)2周;N組和PAH組經尾靜脈注射同等體積的生理鹽水。2周后,測定各實驗組大鼠血流動力學變化、右心室肥厚指數(RV/LV+S)、肺小動脈管壁厚度指數(TI),以及肺小動脈管腔面積指數(AI)。
結果:肺動脈高壓組干預治療2周后,MP組和MSCs組的平均肺動脈壓(MPAP)、RV/LV+S、TI、A
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