肺動(dòng)脈高壓大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)功能.pdf

1、目的：
　　通過(guò)研究肺動(dòng)脈高壓(pulmonary arterial hypertension，PAH)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells， BMSCs)的增殖、血管形成能力并其探討生物學(xué)特性。為BMSCs移植治療PAH提供初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　在大鼠腹腔內(nèi)給予10％野百合堿(60mg/kg)注射建立肺動(dòng)脈高壓模型，按體重注射相應(yīng)體積生理鹽水制作正常組

2、模型;MCT注射3周后同時(shí)測(cè)定PAH組和正常組大鼠肺血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)（平均肺動(dòng)脈壓）、測(cè)左心室(LV)、室間隔(S)及右心室(RV)質(zhì)量，利用RV/(LV+S)計(jì)算得到右心室肥厚指數(shù)RVHI; H.E染色觀察肺小動(dòng)脈壁結(jié)構(gòu);通過(guò)血球自動(dòng)分析儀測(cè)定大鼠靜脈血中的中性粒細(xì)胞百分比;密度梯度離心聯(lián)合貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)PAH組和正常組大鼠BMSCs，倒置顯微鏡下觀察并用照相機(jī)拍照BMSCs形態(tài);用流式細(xì)胞儀儀器檢測(cè)細(xì)胞多個(gè)表面抗原來(lái)綜合鑒定BMS

3、Cs，并在體外進(jìn)行血管形成實(shí)驗(yàn);CCK-8法測(cè)定BMSCs的生長(zhǎng)曲線。
　　結(jié)果：
　　1.野百合堿注射3周后，較正常組大鼠，PAH組大鼠mPAP和RVHI明顯升高(P＜0.01)。2.靜脈血分析:與正常組大鼠相比，PAH組大鼠中性粒細(xì)胞百分比顯著升高(P＜0.01)。3.H.E染色切片顯示PAH組大鼠肺小動(dòng)脈管壁較正常組大鼠顯著增厚。4.流式細(xì)胞儀儀器檢測(cè)大鼠BMSCs表面標(biāo)志:較正常組大鼠，PAH組大鼠BMSCs陽(yáng)性表面

4、標(biāo)志CD44、CD90表達(dá)率顯著減少(P＜0.05)，陰性表面標(biāo)志CD31、CD34、CD45表達(dá)率顯著增加（P＜0.05）。5.PAH組大鼠BMSCs較正常組大鼠生長(zhǎng)增殖能力均明顯下降。6.血管形成實(shí)驗(yàn):與正常組大鼠BMSCs比較，PAH組大鼠BMSCs形成血管腔數(shù)顯著減少（P＜0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、通過(guò)采用在腹腔內(nèi)注射野百合堿的方法成功制作大鼠肺動(dòng)脈高壓模型。2、PAH大鼠體內(nèi)存在炎癥。3、采用Ficoll密