甲基強(qiáng)的松龍對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性的影響.pdf

1、目的:研究不同濃度的甲基強(qiáng)的松龍（甲強(qiáng)龍）對(duì)BMSCs增殖、凋亡和成骨分化的影響，探討其可能的機(jī)制。
　　 方法:從4周齡雌性SD大鼠中獲取骨髓細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，并通過表面抗原和多能分化能力鑒定其為BMSCs。含不同濃度（10-5-10-8mol/L）甲強(qiáng)龍的培養(yǎng)液作用于BMSCs，通過MTS法檢測(cè)甲強(qiáng)龍對(duì)BMSCs增殖的影響，通過Annexin V/PI雙染色法檢測(cè)甲強(qiáng)龍對(duì)BMSCs凋亡的影響。不同濃度的甲強(qiáng)龍（10-5-10

2、-8mol/L）加維生素C和甘油誘導(dǎo)BMSCs成骨分化，21天后進(jìn)行茜素紅染色，并采用RT-PCR法檢測(cè)成骨相關(guān)基因(ALP、OPN、OCN和BMP-2)的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:原代細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，CD29和CD90陽性，CD45和CD34陰性，而且這些細(xì)胞具有向成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞分化的多向分化能力，表明提取的細(xì)胞屬于BMSCs。研究還發(fā)現(xiàn)，高濃度的甲強(qiáng)龍(≥10-6 mol/L)組中細(xì)胞相對(duì)增值率(ODmts)較對(duì)照組明顯下降

3、，細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率(IR)明顯升高，BMSCs細(xì)胞裂解壞死增加，數(shù)量減少，凋亡率明顯升高，而低濃度的甲強(qiáng)龍(≤10-7moL/L)的ODmts、IR和凋亡率與對(duì)照組差異不大。10-6moL/L、10-7moL/L甲強(qiáng)龍組茜素紅染色陽性，ALP、OPN、OCN和BMP-2表達(dá)量明顯高于對(duì)照組，而10-5moL/L和10-8moL/L甲強(qiáng)龍組茜素紅染色陰性，ALP、OPN、OCN和BMP-2表達(dá)量保持在較低水平。單獨(dú)抗壞血酸和β-甘油磷酸誘

4、導(dǎo)組茜素紅染色陰性，ALP、OPN、OCN和BMP-2表達(dá)量與對(duì)照組比較沒有明顯差異。
　　 結(jié)論:研究表明:1.高濃度甲強(qiáng)龍(≥10-6 mol/L)能夠明顯抑制BMSCs增殖，并且顯著促進(jìn)BMSCs凋亡，而低濃度組作用變化沒有顯著差異，提示甲強(qiáng)龍對(duì)BMSCs增殖和凋亡的影響具有濃度依賴性。2.只有在濃度適當(dāng)?shù)臈l件下，甲強(qiáng)龍可以誘導(dǎo)BMSCs成骨分化，而濃度過高或過低均不利于誘導(dǎo)成功。綜合既往研究成果，發(fā)現(xiàn)甲強(qiáng)龍不僅在成骨細(xì)胞