骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜微粒對大鼠肺動脈高壓的免疫調(diào)控作用及機(jī)制研究.pdf

1、[目的]
　　通過間充質(zhì)干細(xì)胞膜微粒(Mesenchymal stem cells-derived microparticles，MSC-MP)干預(yù)大鼠肺動脈高壓(Pulmonary artery hypertension，PAH)，探討其對PAH炎癥反應(yīng)的免疫調(diào)控作用及其可能的機(jī)制。
　　[方法]
　　1.取2-3周齡SPF級SD大鼠的骨髓，全骨髓貼壁法培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;流式細(xì)胞術(shù)行表面抗原鑒定、成骨成脂誘導(dǎo)分化

2、行功能學(xué)鑒定。低營養(yǎng)條件下誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)釋放膜微粒(MP)，低溫超速離心提取后行流式細(xì)胞術(shù)檢測表面抗原、透射電鏡行形態(tài)學(xué)檢查、BCA測定其蛋白濃度。
　　2.將SPF級SD大鼠分為三組:間充質(zhì)干細(xì)胞膜微粒干預(yù)組（MP組），肺動脈高壓組（PAH組）和正常對照組(NOR組)，每組再按干預(yù)時間的長短分為兩個亞組即A組(14天)和B組(28天)。MP組和PAH組采取一次性腹腔注射野百合堿(MCT50mg/Kg)構(gòu)建PAH模型，

3、MP組于造模第2天開始隔2日尾靜脈注射MPs30ug/只，NOR組及PAH組為注射等量生理鹽水;分別14天及28天后將2組大鼠測壓后處死.。
　　3.檢測各組大鼠右心肥厚指數(shù)(RV/LV+S)、肺小動脈管壁厚度指數(shù)(TI)、肺小動脈管腔面積指數(shù)(AI)、血管周圍炎癥評分(IS)、肺泡腔紅細(xì)胞滲出評分(ES)及組織纖維化評分(FS)。ELISA法檢測大鼠外周血血清及肺組織懸液趨化因子CX3CL1與CCL5以及炎癥因子促炎因子IL-1

4、、TNF-α與抑炎因子IL-10、TGF-β的表達(dá)水平。
　　[結(jié)果]
　　MPA組、PAHA組、NORA組平均肺動脈壓(mPAP)、平均右心室壓(mRVP)、RV/LV+S、TI、AI、FS均無明顯差異(P＞0.05);而MPB組與PAHB組相較，上述指標(biāo)均低于PAHB組(P＜0.01)。MP組與PAH組比較，血管周圍炎癥評分(IS)及肺泡紅細(xì)胞滲出指數(shù)(ES)均低(P＜0.01); MP組大鼠的外周血血清及肺組織懸液中C

5、X3CL1及CCL5的水平亦顯著低于PAH組(P＜0.01); MP組促炎因子IL-1及TNF-α在血清及肺組織中的表達(dá)水平明顯低于PAH組(P＜0.01)，而抑炎因子IL-10及TGF-β的表達(dá)水平明顯高于PAH組(P＜0.01)，甚至高于NOR組(P＜0.05)。
　　[結(jié)論]
　　1.MSC-MP干預(yù)可以顯著降低肺動脈壓力，抑制血管周圍炎，減輕炎癥滲出，推測其對大鼠形成肺動脈高壓的進(jìn)程中可起到免疫調(diào)控的作用。