人脫嘌呤-脫嘧啶核酸內(nèi)切酶1作為惡性腫瘤生物標(biāo)志物的價值研究.pdf

1、目的:
　　人脫嘌呤/脫嘧啶核酸內(nèi)切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease1,APE1)是堿基切除修復(fù)(Base excision repair, BER)途徑的關(guān)鍵蛋白,主要參與AP位點的剪切。前期體外實驗發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)APE1蛋白表達(dá)水平與亞細(xì)胞定位與腫瘤對放化療的敏感性有密切關(guān)系,且其多態(tài)性位點 Asp148Glu也曾報道在其他人群中與多種腫瘤發(fā)病風(fēng)險改變有關(guān)。本研究在中國人群中分別從蛋白和基因

2、水平探討APE1與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,明確其表達(dá)特征與易感人群,并為腫瘤藥物敏感性與易感性的機(jī)制提供實驗依據(jù),以便腫瘤治療優(yōu)化決策與篩選易感人群。
　　方法:
　　課題分為兩部分。第一部分采用免疫組化方法對733例非小細(xì)胞肺癌組織標(biāo)本進(jìn)行染色分析,目的蛋白為APE1、BRCA1、ERCC1、TUBB3、TS和RRM1六種化療藥物相關(guān)蛋白,并按照其表達(dá)強弱分為陰性與陽性,觀察這六種蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)特征,分析其表達(dá)

3、水平與組織學(xué)類型的相關(guān)性,以及六種蛋白表達(dá)水平彼此間的相關(guān)性。第二部分則分別收集247例結(jié)直腸癌患者與300例無腫瘤健康對照的外周血,提取全血 DNA,采用兩對交叉引物聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase chain recation with confronting two-pair primers, PCR-CTPP)技術(shù)分析BER途徑三種關(guān)鍵蛋白的四種基因多態(tài)性(OGG1 Ser326Cys、APE1 Asp148Glu、啟動子區(qū)

4、域的-141T/G與XRCC1 Arg399Gln),采用Logistic回歸模型分析這些多態(tài)性與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險之間的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　在非小細(xì)胞肺癌中,BRCA1、TUBB3和 TS三個標(biāo)志物在不同組織學(xué)類型間的表達(dá)存在統(tǒng)計學(xué)差異( P<0.01),三種標(biāo)志物表達(dá)程度與病理類型具有統(tǒng)計學(xué)關(guān)聯(lián)(P<0.01)。BRCA1與TS的陽性率在腺癌中最低(16.77％與6.13%),而TUBB3的陽性率則在鱗癌中最低(27.

5、39%)。六種標(biāo)志物表達(dá)彼此間存在廣泛相關(guān)性,APE1分別與ERCC1、RRM1、TUBB3呈正相關(guān)(r=0.316、r=0.222及r=0.107,P<0.01),與BRCA1的相關(guān)性較弱(r=0.083,P<0.05);ERCC1與BRCA1、RRM1、TS呈正相關(guān)(r=0.214,r=0.109及r=0.129,P<0.05);BRCA1與TS、RRM1也呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.188與0.094;TUBB3與 RRM1之間也

6、具有微弱相關(guān)性(r=0.090)。在結(jié)直腸癌中,APE1的148 Glu/Glu基因型在結(jié)直腸癌患者中顯著高于對照人群(28.34% vs.13.67%, P<0.001)。相比APE1 Asp/Asp基因型,Glu/Glu基因型與CRC風(fēng)險升高之間存在顯著統(tǒng)計學(xué)關(guān)聯(lián)性(OR=2.411,95%CI:1.497~3.886;P<0.001)。APE1的Glu等位基因頻率在結(jié)直腸癌患者中顯著高于對照組(46.56% vs.36.50%;

7、OR=1.516,95% CI:1.189~1.932,P<0.001)。亞組分析提示,APE1148 Glu/Glu基因型在吸煙者與不吸煙者中都發(fā)現(xiàn)與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險升高有關(guān)(吸煙者:OR=3.299,不吸煙者:OR=2.336;P<0.05)。與XRCC1399純合基因型(Arg/Arg聯(lián)合Gln/Gln)相比,Arg/Gln雜合基因型的OR值在吸煙者中顯著下降(OR=0.289,P<0.001),且XRCC1 Arg399Gln基

8、因多態(tài)性與吸煙狀況間存在交互作用(交互作用P<0.05)。APE1啟動子區(qū)域的-141位點T/G基因型在BMI<25 kg/m2的個體結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險降低(OR=0.214,P<0.05)。在身體質(zhì)量指數(shù)(Body mass index, BMI)與 APE1的141位點多態(tài)性間發(fā)現(xiàn)存在交互作用(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　化療藥物相關(guān)蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)與組織學(xué)類型有關(guān),6種蛋白彼此間存在廣泛關(guān)聯(lián)性。對這些