林麝腸道乳酸菌耐藥基因PCR檢測及復(fù)合微生態(tài)制劑的研制.pdf

1、本研究通過檢測林麝腸道分離的14株乳酸菌的耐藥基因，為微生態(tài)制劑菌株的選擇提供一個耐藥性的參考，并且為后續(xù)監(jiān)測林麝腸道乳酸菌耐藥基因攜帶情況提供對比數(shù)據(jù)。同時采用林麝腸道分離的乳酸菌研制一種復(fù)合微生態(tài)制劑，對復(fù)合微生態(tài)制劑在林麝養(yǎng)殖上的應(yīng)用進行了初步的研究。
　　(1)本研究采用PCR(Polymerase chain reaction)方法對14株林麝腸道乳酸菌進行了磺胺類（sul、 sul2、sul3），喹諾酮類(qnrA、q

2、nrB、qnrS、qepA、aac(6')-Ⅰb-cr），四環(huán)素類(tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetM、tetW)，氨基糖苷類(aph(3')-Ⅱa、ant(3")-Ⅰa、ant(6)），β-內(nèi)酰胺類（blaTEM、 blaSHV、 blaCTX-M、 bla），萬古霉素（vanA、vanB），氯霉素類（cat、catA）這7類抗生素的26個耐藥基因的檢測。結(jié)果顯示，磺胺類（sul1、 sul2、sul3），喹諾

3、酮類（qnrA、qnrB、qnrS、qepA），四環(huán)素類(tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetW)，氨基糖苷類(aph(3')-Ⅱa、ant(3")-Ⅰa、ant(6）），β-內(nèi)酰胺類（blaTEM、 blaSHV、blaCTX-M、 bla），萬古霉素（vanA、vanB），氯霉素類（cat、catA）耐藥基因檢測結(jié)果為陰性。2個耐藥基因檢測陽性，包括喹諾酮類(aac(6')-Ⅰb-cr(57.14％))和四環(huán)素類

4、(tetM(57.14％))。
　　(2)設(shè)計了3種不同配方的復(fù)合微生態(tài)制劑，給小白鼠飼喂后，分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)C組小鼠盲腸內(nèi)容物中乳酸菌總數(shù)大于另外兩種，選擇C組復(fù)合微生態(tài)制劑（植物乳酸菌∶嗜酸乳桿菌∶明串球菌=1∶1∶2）進行后續(xù)試驗。對復(fù)合微生態(tài)制劑C進行安全性試驗，結(jié)果顯示其沒有引起小白鼠機體不良反應(yīng)，表明此復(fù)合微生態(tài)制劑是安全的。并且監(jiān)測復(fù)合微生態(tài)制劑活菌數(shù)發(fā)現(xiàn)復(fù)合微生態(tài)制劑最佳使用時間是14d內(nèi)，并且最佳儲存溫度為-20℃。