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文檔簡介
1、目的:
研究鉛暴露對SH—SY5Y細胞APP、DNMT1基因表達和總甲基化水平的影響
方法:
1 培養(yǎng)SH—SY5Y細胞，并將其暴露于不同濃度的醋酸鉛溶液中，用MTT法檢測不同劑量的醋酸鉛對SH—SY5Y細胞生長曲線的影響。
2 實時熒光定量PCR檢測暴露于不同濃度的醋酸鉛溶液中的SH—SY5Y細胞，在分化過程中APP和DNMT1基因的mRNA表達水平。
3 根據(jù)D
2、NA提取試劑盒操作說明提取SH—SY5Y細胞的基因組DNA。然后使用DNA總甲基化檢測試劑盒進行DNA總甲基化的檢測。
結(jié)果:
1 隨著培養(yǎng)基中鉛濃度的增加，各組細胞MTT值隨之減少。醋酸鉛濃度為50μmol/l時，鉛對SH—SY5Y細胞增值有抑制的作用。
2和對照組相比，50μmol/l濃度的鉛刺激下，APP mRNA變化倍數(shù)為1.09，上調(diào)了9％;DNMT1 mRNA變化倍數(shù)為0.91，下降
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