2，3-吲哚醌對人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y凋亡和端粒酶表達(dá)的影響.pdf

1、目的 研究2，3-吲哚醌(2，3-dioxoindoline，ISA)對人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y凋亡和端粒酶表達(dá)的影響。 方法 體外培養(yǎng)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y細(xì)胞，將SH-SY5Y細(xì)胞隨機(jī)分為對照組和ISA不同濃度(0、100、200、400μmol·L<'-1>)處理組，采用Hochest33258熒光染色和瓊脂糖凝膠電泳分析細(xì)胞凋亡；采用Western blotting檢測凋亡抑制基因bcl

2、-2、凋亡基因bax蛋白表達(dá)的變化；采用RT-PCR檢測加藥后SH-SY5Y細(xì)胞端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)mRNA表達(dá)水平的變化。 結(jié)果 100、200、400μmol·L<'-1>ISA處理SH-SY5Y細(xì)胞48h后，熒光染色可觀察到明顯的細(xì)胞凋亡的核濃縮、核聚集的形態(tài)變化； bcl-2蛋白表達(dá)逐漸減少(P<0.05)，各組間比較差別有統(tǒng)計學(xué)意義；bax蛋白表達(dá)水平未見明顯變化(P>0.05)：hTERTmRNA表達(dá)

3、水平降低(P<0.05)，各組間差異比較有統(tǒng)計學(xué)意義；200、400μmol·L<'-1>IsA處理SH-SY5Y細(xì)胞48h，瓊脂糖凝膠電泳可見DNA梯帶。 結(jié)論 2，3-吲哚醌能明顯誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞凋亡，并在一定濃度范圍內(nèi)呈濃度依賴關(guān)系。在2,3-吲哚醌誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞凋亡過程中，涉及細(xì)胞形態(tài)、DNA的斷裂、bcl-2和bax蛋白水平的改變以及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶hTERTmRNA水平的改變。2，3-吲哚醌可能通