花菁染料的共振光散射研究及分析應(yīng)用.pdf

1、花菁染料具有大的摩爾吸光系數(shù)和高的熒光量子產(chǎn)率,通過共軛鏈長度的調(diào)節(jié),花菁的光譜可以從可見光區(qū)一直延伸到近紅外區(qū),采用紅區(qū)測量可有效地排除背景干擾;同時,花菁具有很強(qiáng)的聚集能力,對外界微環(huán)境的變化極為敏感,可產(chǎn)生明顯的共振光散射信號變化.紅區(qū)花菁染料的共振光散射測量有望將共振光散射的高靈敏度與紅區(qū)信號的高選擇性有機(jī)結(jié)合,非常適合某些環(huán)境及生物樣品的分析研究.本論文在查閱大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上,結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室條件,以合成的兩種花菁化合物作為探針,

2、利用共振光散射技術(shù)研究了它們與表面活性劑及核酸的相互作用,建立了表面活性劑及多個核酸測定的新方法.全文共分六章.
　　第一章：緒論
　　首先綜述了花菁染料的分類、性質(zhì)和應(yīng)用研究.著重介紹了花菁的聚集性質(zhì)、以及花菁染料在生物分析方面的應(yīng)用進(jìn)展.然后綜述了共振光散射技術(shù)的基本原理和分析應(yīng)用.最后提出了論文設(shè)想.
　　第二章：儀器、試劑與探針合成
　　介紹了實(shí)驗(yàn)所用儀器、試劑及本論文所涉及的兩種探針的合成.
　　

3、第三章：近紅外花菁I共振光散射法測定陰離子表面活性劑
　　研究了在pH6.30磷酸鹽緩沖介質(zhì)中近紅外陽離子花菁Ⅰ與陰離子表面活性劑(SDBS)相互作用的共振光散射光譜,并探討了其作用機(jī)理.研究表明,花菁Ⅰ與陰離子表面活性劑有強(qiáng)烈的相互作用,由于形成離子締合物,花菁Ⅰ的聚集形態(tài)發(fā)生了變化,導(dǎo)致了明顯的光譜變化,共振光散射增強(qiáng),最大散射波長位于823nm;并且發(fā)現(xiàn)共振光散射強(qiáng)度增加值與加入的SDBS的濃度呈正比.建立了靈敏的共振光散射

4、測定陰離子表面活性劑的方法.考察了pH值、有機(jī)溶劑用量等影響反應(yīng)的因素,并且實(shí)現(xiàn)了環(huán)境水樣中痕量陰離子表面活性劑的快速測定.
　　第四章：苯并噻唑花菁Ⅱ作為RLS探針在核酸測定中的應(yīng)用
　　借助RLS光譜法研究了苯并噻唑花菁Ⅱ與DNA的相互作用.花菁Ⅱ在590nm處有一弱的RLS峰.在痕量DNA存在下,RLS強(qiáng)度顯著增強(qiáng).在最佳條件下,增強(qiáng)的RLS強(qiáng)度與DNA濃度具有良好的線性關(guān)系.建立了RLS增強(qiáng)測定DNA的方法.方法具有

5、檢出限低、線性范圍寬、反應(yīng)速度快、操作簡單的特點(diǎn).初步研究表明,核酸對花菁RLS的增強(qiáng)作用可能是由于花菁染料在DNA模板上自組裝成J-聚集體所致.
　　第五章：近紅外花菁Ⅰ共振光散射法測定核酸
　　用RLS技術(shù)考察了花菁Ⅰ與核酸的相互作用.研究發(fā)現(xiàn)：通過靜電和疏水作用,花菁染料與核酸結(jié)合形成大的聚集體,引起RLS增強(qiáng)效應(yīng),散射峰分別位于823nm和630nm.基于823nm處增強(qiáng)的RLS強(qiáng)度與核酸濃度之間的關(guān)系,建立了一種近

6、紅外RLS測定核酸的方法.該方法除了擁有明顯的近紅外區(qū)測量的優(yōu)勢,即低的背景干擾外,還顯示出RLS技術(shù)的高靈敏性.該法應(yīng)用于合成和實(shí)際核酸樣品的測定,結(jié)果令人滿意.
　　第六章：花菁Ⅰ-Triton X-100-核酸體系的RLS光譜及分析應(yīng)用
　　在這一章里,進(jìn)一步研究了表面活性劑存在下近紅外花菁Ⅰ的RLS光譜并且應(yīng)用于核酸的分析.研究表明,Triton X-100在靠近其臨界膠束濃度(CMC)時產(chǎn)生了膠束前預(yù)聚集過程,導(dǎo)致