10260.共振光散射技術(shù)在核酸分析中的研究及其應(yīng)用

1、分類號密級UDC學(xué)號20110913012青海師范大學(xué)碩士學(xué)位論文共振光散射技術(shù)在核酸分析中的研究及其應(yīng)用研究生姓名夏曉姍導(dǎo)師姓名（職稱）王建朝，教授申請學(xué)位類別碩士學(xué)科專業(yè)名稱無機(jī)化學(xué)研究方向名稱超分子化學(xué)論文提交日期2014年3月論文答辯日期2014年6月學(xué)位授予單位青海師范大學(xué)學(xué)位授予日期2014年6月答辯委員會主席評閱人，I共振光散射技術(shù)在核酸分析中的研究及其應(yīng)用中文摘要核酸是遺傳信息的載體和基因表達(dá)的物質(zhì)基礎(chǔ)在生物的生長、發(fā)育

2、等活動中具有十分重要的作用。核酸的研究逐漸成為生命科學(xué)中的活躍領(lǐng)域，核酸的定量測定是分子生物學(xué)領(lǐng)域研究的基礎(chǔ)，而核酸與小分子的相互作用研究對發(fā)現(xiàn)新藥物和在基因水平上疾病的治療尤其是藥物分子的作用機(jī)理具有非常重要的意義因此一直是人們關(guān)注和研究的課題之一。本論文以建立對核酸和有機(jī)染料及藥物痕量組分的分析為目的，建立了測定核酸的共振光散射新方法，并對各實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行研究和優(yōu)化，主要進(jìn)行了以下幾方面的創(chuàng)新性研究工作。1.研究了吖啶橙與酵母核糖核酸

3、相互作用的共振光散射光譜(RLS)和紫外可見吸收光譜的特征，建立了測定酵母核糖核酸的新分析方法。在堿性條件下，酵母核糖核酸與吖啶橙相互作用，在333nm處產(chǎn)生顯著增強(qiáng)的散射信號。共振光散射增強(qiáng)的程度與酵母核糖核酸的質(zhì)量濃度呈良好的線性關(guān)系，在最佳的實(shí)驗(yàn)條件下，測定酵母核糖核酸的線性范圍為0.05~15.0μgmL，檢出限為0.017μgmL。該方法簡單、快速、靈敏度高，將該法用于合成樣品中酵母核糖核酸的測定，結(jié)果令人滿意。2.將4氨基安

4、替比林(4AAP)用于酵母核糖核酸的共振光散射測定。在pH=4.78的緩沖溶液中，酵母核糖核酸的加入導(dǎo)致4氨基安替比林在472nm處共振光散射的增強(qiáng)，其增強(qiáng)強(qiáng)度與酵母核糖核酸的濃度呈線性關(guān)系，據(jù)此建立了一種測定酵母核糖核酸的共振光散射法。該方法的線性范圍為0.25~18.0μgmL，檢出限為0.23μgmL。該方法具有操作簡單，線性范圍寬，檢出限低的特點(diǎn)。3.研究了溴酚藍(lán)(BPB)在陽離子表面活性劑CTMAB存在下與核酸的共振光散射光譜

5、。在pH=4.78的條件下，溴酚藍(lán)和表面活性劑在核酸分子表面上發(fā)生聚集，形成了核酸CTMAB溴酚藍(lán)締合物聚集體。在形成締合物的過程中，CTMAB縮短了溴酚藍(lán)與核酸之間的距離，增強(qiáng)了它們之間的相互作用。共振光散射的增強(qiáng)程度與核酸的濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，據(jù)此建立了一種新的測定核酸的共振光散射法。yRNA與DNA的線性范圍分別為0.15~10.0μgmL和1.0~10.0μgmL，檢出限分別為0.12μgmL和0.23μgmL。關(guān)鍵詞：