共振光散射技術(shù)在蛋白質(zhì)及藥物分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、近年來，共振光散射(RLS)法作為一種新的光學(xué)分析技術(shù)，方法簡(jiǎn)單，靈敏度高，可以用普通的熒光分光光度計(jì)測(cè)量，因此，該方法得到了廣泛的應(yīng)用。例如，共振光散射技術(shù)被用于表征有機(jī)染料的聚集，有機(jī)染料和金屬配合物在生物大分子模板上的堆積，以及藥物分子與生物大分子的相互作用等，廣泛用于無機(jī)離子、蛋白質(zhì)、核酸和藥物的測(cè)定中。RLs技術(shù)已成為超分子化學(xué)、物理化學(xué)和分析化學(xué)領(lǐng)域中強(qiáng)有力的分析技術(shù)。 研究了陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(sDs)

2、，陽離子染料羅丹明B，與蛋白質(zhì)相互作用的共振光散射(RLs)光譜及用于蛋白質(zhì)的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)表明，在pH 4.35的酸性介質(zhì)中，sDS的共振光散射強(qiáng)度較小，它與蛋白質(zhì)結(jié)合后，共振光散射強(qiáng)度能得到增強(qiáng)，但加入陽離子染料羅丹明B后，共振光散射強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。在波長(zhǎng)332.0 nm處，△/<,RLS>最大，并且增強(qiáng)的共振光散射信號(hào)與蛋白質(zhì)的濃度成正比。據(jù)此建立了一種測(cè)定蛋白質(zhì)的新方法，該方法簡(jiǎn)單，快速，靈敏度高，對(duì)HsA的檢測(cè)限達(dá)到1.9 ng/m

3、L，線性范圍為0.01～5.0μg/mL。用于人血清樣品中蛋白質(zhì)的測(cè)定，回收率為94.0％～105.5％。 研究了陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)，三種醌亞胺類染料天青A，天青B，亞甲基藍(lán)，與蛋白質(zhì)相互作用的共振光散射(RLS)光譜及用于蛋白質(zhì)的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)表明，在pH 4.10的條件下，SDS的共振光散射強(qiáng)度較小，它與蛋白質(zhì)結(jié)合后，共振光散射強(qiáng)度能得到增強(qiáng)，但加入一種陽離子染料后，共振光散射強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，并且增強(qiáng)的共振光

4、散射信號(hào)與蛋白質(zhì)的濃度成正比。由HSA-SDS與這三種陽離子染料研究的結(jié)果可以推出一般結(jié)論，當(dāng)pH值在HSA(pI<,0>=4.7-4.9)的等電點(diǎn)之下時(shí)，HSA帶正電荷，它與陰離子表面活性劑SDS結(jié)合后，再與陽離子染料作用，可以產(chǎn)生增強(qiáng)的共振光散射光譜。據(jù)此建立了一種測(cè)定蛋白質(zhì)的新方法，該方法簡(jiǎn)單，快速，靈敏度高。用于人血清樣品中蛋白質(zhì)的測(cè)定，回收率為93.0％～104.0％。巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有丙二酰脲或者酰亞胺基團(tuán)，在堿性條