蛇葡萄素脂質體劑型的研究.pdf

1、本文研究的目的：從蛇葡萄素脂質體凍干粉的工藝研究入手，探討蛇葡萄素的理想劑型。其意義是為蛇葡萄素的早日開發(fā)提供藥劑學實驗資料。 研究方法： 1.用均勻設計法優(yōu)化選擇蛇葡萄素和各種處方之間的關系，尋找合適比例，用旋轉薄膜—超聲法制備制作蛇葡萄素脂質體，觀察外觀。 2.利用電子顯微鏡用負染色法觀察脂質體表面形態(tài)。用Zetasizer3000(粒度測定儀)測定粒徑。用紫外分光光度法測定標準曲線，回收率，樣品含量，精密度

2、和磷脂氧化率。用透析袋和磁力攪拌器結合紫外分光光度法測定蛇葡萄素脂質體的包封率，滲漏率。 3.利用冷凍干燥技術把蛇葡萄素脂質體制成凍干粉，從而制成前體脂質體。 4.用MTT法測定蛇葡萄素脂質體對人肝癌細胞HepG2增殖的影響，計算抑制率和IC50，同時，觀察是否存在時間和劑量依賴性。 5.用MTT法測定蛇葡萄素脂質體對人白血病細胞K562增殖的影響，計算抑制率和IC50，同時，觀察是否存在時間和劑量依賴性。

3、 研究結果： 1.成功制得蛇葡萄素脂質體，成品呈乳白色透明狀混懸液，顏色均勻。 2.(1)利用電子顯微鏡用負染色法觀察脂質體表面形態(tài)中的脂質體微球呈典型單室，規(guī)則橢圓型，大小相近，分散均勻。用Zetasizer3000(粒度測定儀)測定粒徑：258.2±51.2nm，表面電荷19.0mV；(2)回收率(n=3)：(102.14±0.42)％；(3)藥物總濃度(n=3)：C=16.69±0.06mg/ml；(4)藥物的包

4、封率(n=3)為：(62.3±0.1)％，藥物的滲漏率(n=3)為：第五天：(2.4±0.8)％；第十五天：(6.1±1.7)％；第三十天：(13.9±1.3)％；第五十天：(19.4±2.2)％；(5)磷脂氧化率(n=3)：(0.83±0.01)％。 3.(1)蛇葡萄素脂質體制得的凍干粉均呈疏松，均勻，飽滿狀，加水經輕搖即可良好分散。凍干粉西林瓶密封后，可長時間保存外觀不變。(2)蛇葡萄素脂質體凍干粉水溶解后的外觀和包封率隨時

5、間的延長變化不大，包封率第一天：(60±1.2)％；第三十天：(60±0.5)％；第五十天：(59.3±1.3)％。 4.不同濃度的蛇葡萄素脂質體對人肝癌細胞HepG2有不同的增殖抑制作用，且呈明顯的劑量和時間依賴性關系，蛇葡萄素脂質體含藥量在體外濃度為27、54、108、216、432、864、1728μmol/L，處理時間為24h、48h、72h時，脂質體劑型的IC5o分別是687.8μmol/L、204.0μmol/L和8

6、4.0μmol/L，非脂質體的IC50分別是455.5μmol/L、250.4μmol/L和222.8μmol/L。 5.不同濃度的蛇葡萄素脂質體劑型對人白血病細胞K562有不同的增殖抑制作用，且呈明顯的劑量和時間依賴性關系，蛇葡萄素脂質體含藥量在體外濃度為3.4、6.8、13.6、27.2、54.4、108.8、217.6μmol/L，處理時間分別為24h、48h、72h時，脂質體劑型的IC50分別是46.3μmol/L、34

7、.3μmol/L和12.6μmol/L，非脂質體的IC50分別是37.1μmol/L、25.0μmol/L和23.4μmol/L。 研究結論：實驗結果表明成功制備了蛇葡萄素脂質體劑型，并確定蛇葡萄素脂質體的分離、質量評價及穩(wěn)定性研究。蛇葡萄素脂質體制成凍干粉后，有利于保存并且對蛇葡萄素脂質體的包封率影響不大。蛇葡萄素脂質體劑型和同等含藥濃度的蛇葡萄素非脂質體都具有抑制人肝癌細胞HepG2和人白血病細胞K562增殖的作用，但是在藥