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1、目的:蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)后腦血管痙攣(CVS)??梢饑?yán)重的腦組織缺血或遲發(fā)性缺血性腦損害。CVS呈雙相性,一種為早發(fā)性,多見于SAH后0.5 h~3 d內(nèi),也稱急性CVS;另一種為遲發(fā)性腦血管痙攣(DCVS),于出血后4—15 d發(fā)生,7~10d為高峰期。DCVS對(duì)血管擴(kuò)張劑的反應(yīng)較差,難于逆轉(zhuǎn),是遲發(fā)性腦缺血最常見的原因,早有研究認(rèn)為蛛網(wǎng)膜下腔出血性遲發(fā)性腦血管痙攣(DCVS)是由于血管的病理性變化而非單純功能性痙攣所致。本研
2、究采用RT-PCR來檢測(cè)PDGF在SAH后腦動(dòng)脈壁中基因轉(zhuǎn)錄變化,探討了PDGF在SAH后腦血管病理改變機(jī)制中的作用和基因治療。 方法:日本健康大耳白兔26只,雌雄不限,體重2.8Kg~3.0Kg,隨機(jī)分成對(duì)照組,SAH3天組,SAH7天組。采用枕大池二次注血的方法制備兔蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)模型。對(duì)照組(8只):未予任何處理取材;SAH3天組(9只):在次注血后49h處死取材;SAH7天組(9只):在一次枕大池注血后第7天處
3、死取材。記錄SAH組每只兔每天的飲食、活動(dòng)及神經(jīng)功能評(píng)分情況,其中每組里3只兔用來做光電鏡形態(tài)學(xué)觀察,每組剩下的兔基底動(dòng)脈用RT-PCR方法檢測(cè)PDGF—mRNA表達(dá)及光鏡學(xué)觀察。用SPSS for Windows10.0對(duì)SAH各個(gè)試驗(yàn)組和對(duì)照組的PDGF/β—actin灰度比值進(jìn)行方差分析及兩兩比較用多重比較t檢驗(yàn),P<0.05時(shí),差異有顯著性意義。 結(jié)果:各只兔在SAH后3天臨床癥狀加重,7天時(shí)達(dá)到頂峰。SAH Day3組
4、和Day7組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物開顱取材,蛛網(wǎng)膜下腔可見血性CSF,腦底部、腦池內(nèi),尤其是基底動(dòng)脈周圍存在大小不等暗紅色血凝塊,周圍蛛網(wǎng)膜稍粘連,對(duì)照組則無異常表現(xiàn)。光觀察:對(duì)照組基底動(dòng)脈血管結(jié)構(gòu)正常,SAH Day3組和Day7組可見血管壁增厚,平滑肌細(xì)胞增生明顯、排列紊亂。電鏡觀察:對(duì)照組基底動(dòng)脈血管結(jié)構(gòu)無異常,SAH Day3組和Day7組內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞核形不規(guī)則。正常對(duì)照組基底動(dòng)脈壁中PDGF mRNA的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平均很低,注血3d后
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