樹(shù)狀大分子包裹的納米金顆粒作為非病毒載體用于基因傳遞的研究.pdf

1、基因治療是一種通過(guò)將體外的核酸物質(zhì)作為藥物輸送到特定的細(xì)胞或組織來(lái)修復(fù)體內(nèi)缺陷基因而達(dá)到治療疾病目的的一種醫(yī)療手段，可以用來(lái)治療常見(jiàn)的帕金森綜合癥、囊腫性纖維化、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病和癌癥等由于基因紊亂所導(dǎo)致的疾病?；蛑委煶晒Φ年P(guān)鍵是發(fā)展出一種具有高效特異性和靶向性并且不產(chǎn)生任何毒副作用的理想載體，從而將DNA安全的轉(zhuǎn)移至靶細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行表達(dá)。
　　 眾所周知，基因傳遞系統(tǒng)包括病毒和非病毒載體系統(tǒng)，病毒載體在不同的細(xì)胞系中都表現(xiàn)出

2、了比較高的轉(zhuǎn)染表達(dá)效率，但是病毒載體由于其細(xì)胞毒性、致癌性以及免疫源性等安全性問(wèn)題而限制了它在臨床上的應(yīng)用。非病毒載體具有安全性高、制備簡(jiǎn)單和裝載量大等優(yōu)點(diǎn)，因此，非病毒載體成為了人們新的選擇。目前，在基因傳遞領(lǐng)域發(fā)展高效低毒的非病毒載體仍然是一個(gè)非常具有挑戰(zhàn)性的研究工作。
　　 在本文工作中，我們報(bào)道了一種基于聚酰胺胺(PAMAM)樹(shù)狀大分子的新型基因載體即樹(shù)狀大分子包裹的納米金顆粒(Au DENPs)，并將沒(méi)有包裹納米金的的

3、樹(shù)狀大分子作為對(duì)照來(lái)研究?jī)?nèi)部的納米金粒子的有無(wú)以及大小對(duì)基因轉(zhuǎn)染效率的影響。
　　 本課題主要包含以下研究?jī)?nèi)容：首先，以5代PAMAM為模板合成了不同氯金酸/樹(shù)狀大分子摩爾比的樹(shù)狀大分子包裹的納米金顆粒Au DENPs，然后在不同的N/P比下與質(zhì)粒DNA復(fù)合形成不同的Au DENPs/pDNA復(fù)合物，并通過(guò)凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)對(duì)材料進(jìn)行了表征，最后在三種不同的細(xì)胞系(Hela、COS-7、293T)中對(duì)載體的轉(zhuǎn)染效率以及細(xì)