阿托伐他汀對(duì)K562細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　1.觀察阿托伐他汀對(duì)K562細(xì)胞增殖及凋亡的影響。
　　2.探討阿托伐他汀在K562細(xì)胞中抗腫瘤的的作用機(jī)制。
　　方法:
　　1.常規(guī)培養(yǎng)人慢粒急變細(xì)胞系K562細(xì)胞，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
　　2.CCK-8法檢測(cè)不同濃度阿托伐他汀藥物分別作用K562細(xì)胞24h，48h，72h的細(xì)胞增殖抑制情況。
　　3.AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測(cè)不同濃度阿托伐他汀對(duì)K562細(xì)胞

2、72h細(xì)胞凋亡的影響。
　　4.流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度阿托伐他汀作用K562細(xì)胞72h的細(xì)胞周期。
　　5.比色法檢測(cè)不同濃度阿托伐他汀藥物作用K562細(xì)胞72h后caspase-3，-8，-9的活性。
　　6.qRT-PCR檢測(cè)不同濃度阿托伐他汀作用K562細(xì)胞72h Bcl-2、PDCD5mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.阿托伐他汀對(duì)K562細(xì)胞具有明顯的增殖抑制效應(yīng)，其對(duì)K562細(xì)胞的增殖抑制作用

3、具有明顯的濃度和時(shí)間依賴性（（P＜0.05）。
　　2.12.5umol/L，25umol/L，50umol/L阿托伐他汀作用K562細(xì)胞72小時(shí)細(xì)胞凋亡率分別為(14.11±1.12)％、(22.89±0.87)％和(47.35±1.41)％，與對(duì)照組相比（4.85±0.91）％比較，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，三個(gè)濃度組間兩兩相比差異顯著(P＜0.01)。
　　3.阿托伐他汀處理K562細(xì)胞后，主要表現(xiàn)為G

4、0/G1期細(xì)胞百分比增加，與對(duì)照組相比，差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，S期細(xì)胞百分比下降，顯示出阿托伐他汀能使K562細(xì)胞阻滯于G1/S期，并且隨著濃度增加，阻滯作用逐漸增強(qiáng)，三個(gè)濃度組間兩兩比較差異顯著（P＜0.01）。
　　4.12.5umol/L，25umol/L，50umol/L阿托伐他汀作用K562細(xì)胞72h后caspase-3，-8，-9的表達(dá)增加，與對(duì)照組相比，差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，三個(gè)濃

5、度組間兩兩相比差異顯著（P＜0.01）。
　　5.25umol/L，50umol/L阿托伐他汀作用K562細(xì)胞后抑凋亡基因Bcl-2mRNA表達(dá)下調(diào)，與對(duì)照組相比，差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);而促凋亡基因PDCD5 mRNA的表達(dá)上調(diào)，與對(duì)照組相比，有顯著性差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.阿托伐他汀能明顯抑制K562細(xì)胞的增殖，并呈濃度和時(shí)間依賴性。
　　2.阿托伐他汀可誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋