NudC及信號分子MEKK3和JNK對腎癌細胞遷移能力的影響.pdf

1、研究目的：
　　 (1)比較人胚腎細胞株293和腎癌細胞株OS-RC-2細胞遷移能力的差異。
　　 (2)檢測上述細胞株中核遷移蛋白NudC(NucleardistributiongeneC的表達產(chǎn)物)、有絲分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activatedproteinkinasekinasekinase3,MEKK3)和c-Jun氨基末端激酶(c-JunNH2-terminalkinases,JNK)等

2、信號轉導分子的表達和活性,分析它們與腎癌細胞遷移活性的關系。
　　 研究方法：
　　 (1)采用Transwell方法比較293和OS-RC-2兩個細胞株的遷移能力。
　　 (2)采用RT-PCR方法檢測MEKK3和NudCmRNA在胚腎細胞株293和腎癌細胞株OS-RC-2中的表達。
　　 (3)采用Westernblotting方法檢測NudC、MEKK3、和JNK蛋白在293和OS-RC-2細胞株中

3、的表達,p-MEKK3和p-JNK在兩個細胞株的水平,以及兩個細胞株的細胞核內(nèi)NudC的表達差異。
　　 (4)采用免疫熒光方法檢測NudC在293和OS-RC-2細胞株的定位。
　　 研究結果：
　　 (1)細胞遷移結果顯示,腎癌細胞株OS-RC-2的遷移能力明顯高于胚腎細胞株293。
　　 (2)在mRNA水平,人腎癌細胞株OS-RC-2中MEKK3和NudC表達均明顯高于人胚腎細胞株293。

4、　　 (3)在蛋白水平,人腎癌細胞株OS-RC-2中MEKK3和JNK的磷酸化水平均高于人胚腎細胞株293。
　　 (4)免疫熒光結果和細胞核蛋白表達結果顯示NudC在人腎癌細胞株OS-RC-2的核內(nèi)表達明顯高于人胚腎細胞株293。
　　 結論：
　　 MEKK3和JNK的磷酸化水平在腎癌細胞株OS-RC-2含量增加,NudC在腎癌細胞株核內(nèi)的表達明顯高于正常細胞株,提示NudC以及信號相關分子MEKK3、JN