放療聯(lián)合化療對大鼠脊髓損傷的實驗研究.pdf

1、目的： 在惡性腫瘤的治療中，放射治療是主要的治療手段之一，在針對頭頸部、胸部(肺和食管)、脊柱旁或脊髓等部位的各種惡性腫瘤進行放療時，脊髓常常不可避免受到照射，甚至可能使部分患者引起放射性脊髓損傷。目前惡性腫瘤的治療越來越趨向于綜合治療，尤其是放療和化療的聯(lián)合在臨床中廣泛應用。因此在與化療聯(lián)合治療腫瘤時，由于化療藥物本身的細胞毒性和對放射的增敏作用，可能加重脊髓的損傷。迄今，對于放療、化療引起脊髓損傷機制及放化療聯(lián)合引起脊髓損傷

2、機制的研究很少，仍有許多尚不清楚的領(lǐng)域，尤其是化療藥物本身對于脊髓的損傷尚未引起臨床及基礎(chǔ)研究的重視。本實驗采用化療與分次照射相結(jié)合的方法，建立人類脊髓放射損傷效應研究的動物模型。利用此模型，分組檢測放療、化療以及聯(lián)合治療時大鼠脊髓損傷的程度，光鏡與電鏡下觀察損傷脊髓組織的形態(tài)學變化。并進行免疫組織化學染色檢測caspase-3、Bax、IL-1β及iNOS陽性細胞的表達，探討大鼠脊髓損傷后上述生物因子在損傷脊髓的表達及意義。為臨床進一

3、步提高放、化療綜合治療的療效，降低脊髓損傷的發(fā)生率提供理論依據(jù)。 方法： 選取50只大鼠分四大組，即空白組、單純放療組、單純化療組和放化療聯(lián)合組。單純化療組分為蓋諾組、健擇組、順鉑+蓋諾組、順鉑+健擇組；放化療聯(lián)合組分為蓋諾+放療組、健擇+放療組、順鉑+蓋諾+放療組、順鉑+健擇+放療組，共10組，每組5只大鼠。健擇30mg/kg，蓋諾1.5mg/kg，單次給予；順鉑5mg/kg聯(lián)合用藥，兩藥間隔30min。放射劑量為5G

4、y/次，采用6MeV的電子線，2cm×4em的照射野照射大鼠胸段脊髓，隔日一次，總劑量為40Gy。放化療聯(lián)合組藥物與照射的間隔時間為3天。照射結(jié)束后20周，用4％多聚甲醛進行活體灌注固定，分別進行石蠟切片免疫組織化學染色檢測caspase-3、Bax、IL-1β及iNOS陽性細胞的表達，光鏡和電鏡觀察脊髓的形態(tài)學變化。 結(jié)果： 1、光鏡和電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，各組脊髓分別出現(xiàn)損傷程度不一的改變：單純化療組出現(xiàn)神經(jīng)纖維部分脫髓鞘

5、的輕度反應，單純放療組出現(xiàn)神經(jīng)纖維廣泛脫髓鞘的中度變性，放療聯(lián)合化療組出現(xiàn)神經(jīng)纖維完全脫髓鞘、血管內(nèi)皮細胞死亡，甚至膠質(zhì)細胞增生的重度變性，實驗結(jié)果與人類脊髓放射性損傷的主要病理學變化一致： 2、免疫組織化學染色顯示正常對照組的caspase-3、Bax、IL-1β及iNOS僅存在低水平的基礎(chǔ)表達或不表達，放療聯(lián)合化療組脊髓組織陽性反應表達較單純放療組或單純化療組表達明顯增強。單純放療組比單純化療各組陽性表達增強。 結(jié)論

6、： 1．通過光鏡觀察脊髓的形態(tài)學變化，提示單純化療、單純放療及放化聯(lián)合各組均出現(xiàn)脊髓損傷的形態(tài)學改變，即部分神經(jīng)纖維脫髓鞘的輕度反應和神經(jīng)纖維廣泛脫髓鞘的中度變性以及神經(jīng)纖維完全脫髓鞘、血管內(nèi)皮細胞死亡、甚至膠質(zhì)細胞增生的重度變性。 2．通過電鏡觀察脊髓損傷的超微結(jié)構(gòu)，得出放化合并對脊髓的損傷要更重于單純放療組這一結(jié)論。順鉑+健擇對脊髓的損傷要重于單用健擇組，出現(xiàn)軸索結(jié)構(gòu)消失的改變。順鉑+蓋諾組對脊髓的損傷要重于單用蓋諾

7、組，出現(xiàn)白質(zhì)脫髓鞘、變性，炎細胞浸潤等改變。 3．凋亡因子caspase-3及bax，炎癥因子IL-1β，iNOS在脊髓損傷各組均有過表達，證明上述四種生物因子可能參與了脊髓損傷。尤其是在化療聯(lián)合放射治療各組中caspase-3、Bax、IL-1β及iNOS陽性表達較單純放療組、單純化療組更強，證明放化聯(lián)合治療對脊髓損傷更加嚴重。 4．盡管順鉑、健擇、蓋諾對放療有增敏作用，能增加腫瘤放射敏感性，提高治療效果。但是它們能增