神經(jīng)干細(xì)胞聯(lián)合膠原蛋白支架治療大鼠脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：近年來(lái)，神經(jīng)干細(xì)胞移植和神經(jīng)組織再生生物材料的發(fā)展成為脊髓損傷（Spinal cord injury,SCI）后神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)研究的重點(diǎn)。其中，建立一個(gè)能夠?qū)⑸窠?jīng)干細(xì)胞封裝在神經(jīng)損傷部位，并促進(jìn)干細(xì)胞增殖或誘導(dǎo)其分化為特定方向神經(jīng)細(xì)胞的三維仿生支架成為新的研究熱點(diǎn)。我們初步研究發(fā)現(xiàn)神經(jīng)干細(xì)胞能夠在三維膠原基質(zhì)中生長(zhǎng)，增殖和分化成神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。我們相信，膠原蛋白支架可以提供一個(gè)類似于生物體內(nèi)的三維微環(huán)境，以利于細(xì)胞生長(zhǎng)和分化。

2、神經(jīng)干細(xì)胞聯(lián)合膠原蛋白三維支架在神經(jīng)細(xì)胞移植療法中也可能是有作用的。本實(shí)驗(yàn)旨在研究神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)聯(lián)合膠原支架移植對(duì)脊髓損傷(SCI)大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)的影響。
　　方法：神經(jīng)干細(xì)胞來(lái)源于孕14天大鼠胚胎大腦皮質(zhì)并在體外培養(yǎng)和鑒定。將45只S D大鼠隨機(jī)分為三組：A組（損傷組），B組（神經(jīng)干細(xì)胞移植組）和C組（神經(jīng)干細(xì)胞聯(lián)合膠原移植組）。在顯微鏡下切除所有大鼠脊髓右側(cè)約3毫米的長(zhǎng)度，制作脊髓半切損傷模型，將細(xì)胞或細(xì)胞結(jié)合膠

3、原蛋白植入到損傷部位。采用（BBB）運(yùn)動(dòng)評(píng)分方法評(píng)判脊髓損傷后1周，2周，4周，6周和8周運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況。通過(guò)HE染色和免疫組化方法觀察術(shù)后1周，4周和8周脊髓損傷（SCI）組織中神經(jīng)纖維的再生，神經(jīng)細(xì)胞存活和分化,以及凋亡蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：從細(xì)胞移植后4周起，相比非細(xì)胞移植組，單純細(xì)胞移植組的BBB運(yùn)動(dòng)評(píng)分對(duì)照組高（P<0.05），細(xì)胞聯(lián)合膠原移植組顯著高于其它兩組，第8周與細(xì)胞移植組相比有顯著差異（P<0.05）。蘇木精

4、-伊紅染色顯示，移植的神經(jīng)干細(xì)胞和膠原減少空洞體積和增強(qiáng)白質(zhì)的生長(zhǎng)。免疫組化染色顯示，移植的神經(jīng)干細(xì)胞可以存活下來(lái)，并且分化成為神經(jīng)元，星形膠質(zhì)細(xì)胞以及少突膠質(zhì)細(xì)胞。在第4周和第8周，細(xì)胞聯(lián)合膠原移植組相比細(xì)胞移植組，神經(jīng)元表達(dá)明顯增高（P
　　<0.05），星形膠質(zhì)細(xì)胞相對(duì)減少。神經(jīng)干細(xì)胞聯(lián)合膠原移植組，bax凋亡蛋白明顯降低（P<0.05），而bcl-2抗凋亡蛋白表達(dá)增加。
　　結(jié)論：在大鼠脊髓損傷后8周，移植的神經(jīng)干細(xì)