BBG聯(lián)合小劑量甲潑尼龍治療大鼠脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過Allen打擊法建立SD大鼠急性脊髓損傷動(dòng)物模型，觀察P2X7受體阻斷劑BBG與小劑量甲潑尼龍聯(lián)合應(yīng)用對(duì)實(shí)驗(yàn)性脊髓損傷大鼠的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況、神經(jīng)保護(hù)作用并與大劑量甲潑尼龍對(duì)比。
　　方法:1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組:52只成年雄性S-D大鼠隨機(jī)分為五組:A組:假手術(shù)組、B組:創(chuàng)傷對(duì)照組、C組:BBG組、D組:大劑量甲潑尼龍組和E組:BBG+小劑量甲潑尼龍組。
　　2.建立大鼠脊髓損傷動(dòng)物模型:麻醉狀態(tài)下，顯露大鼠T10節(jié)段

2、脊髓，用10g的打擊桿從12.5mm高度自由落體，撞擊T10節(jié)段脊髓，造成急性脊髓損傷。
　　3.觀察項(xiàng)目:(1)分別在脊髓損傷后第1天、3天、7天、14天、21天、28天、42天應(yīng)用BBB評(píng)分評(píng)價(jià)大鼠運(yùn)功功能的改變;(2)分別于脊髓損傷后第3天、42天灌流取脊髓，HE染色觀察脊髓組織病理改變，LFB染色觀察脊髓殘余白質(zhì)面積;(3)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)GFAP陽(yáng)性細(xì)胞改變。
　　結(jié)果:1.A組（假手術(shù)組）大鼠術(shù)后BBB評(píng)分為2

3、1分，與術(shù)前沒有改變;其余4組大鼠脊髓損傷后1d天BBB評(píng)分均為0分，以后各組大鼠BBB評(píng)分有不同程度的恢復(fù)，到脊髓損傷后42天時(shí)各組大鼠BBB評(píng)分為B組（創(chuàng)傷對(duì)照組）8.25±0.957、C組（BBG組）10.67±0.816、D組（大劑量甲潑尼龍組）12.00±0.632、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍組）12.50±0.837，C、D、E組與B組相比BBB評(píng)分有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，且E組BBB評(píng)分最高;D、E組與C組相比

4、BBB評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，D、E組間BBB評(píng)分未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)
　　2.HE染色觀察:脊髓損傷后3天，損傷區(qū)脊髓結(jié)構(gòu)紊亂，彌漫性出血、水腫，灰白質(zhì)分界不清，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，以單核或多核細(xì)胞為主，各組病理改變差異不明顯。脊髓損傷后第42天，各組損傷區(qū)脊髓組織可見不同程度的修復(fù)改變，中央灰質(zhì)可見空腔形成。其中，D組（大劑量甲潑尼龍組）、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍組）修復(fù)程度明顯好于B組（創(chuàng)傷對(duì)照組）

5、、C組（BBG組）。
　　3.LFB染色觀察:手術(shù)后42天，A組（假手術(shù)組）大鼠光鏡下見脊髓白質(zhì)呈均勻的藍(lán)染，未見脫髓鞘改變，手術(shù)中心脊髓殘余白質(zhì)面積為2.175±0.050mm2。剩余各組脊髓損傷后42天損傷中心脊髓均有不同程度的脫髓鞘改變，白質(zhì)藍(lán)染區(qū)域不同程度的減少，可見淡染區(qū)域，其中B組（創(chuàng)傷對(duì)照組）大鼠脊髓殘余白質(zhì)面積最少，D組（大劑量甲潑尼龍組）、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍組）尚有較多的白質(zhì)殘留，C、D、E組與B組相比

6、具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，C組與D、E組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，而D、E組間未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)
　　4.GFAP免疫組織化學(xué)觀察:在大鼠脊髓損傷后3天，各組大鼠損傷區(qū)脊髓GFAP陽(yáng)性細(xì)胞有不同程度的增加，其中B組（創(chuàng)傷對(duì)照組）大鼠損傷區(qū)脊髓可見大量GFAP陽(yáng)性細(xì)胞，C組（BBG組）、D組（大劑量甲潑尼龍組）、E組（BBG+小劑量甲潑尼龍）與A組（假手術(shù)組）相比GFAP陽(yáng)性細(xì)胞雖有增加，但不如B組明