苧麻體細胞無性變異的RAPD分析與形態(tài)學鑒定.pdf

1、搜集和創(chuàng)造新的種質資源，擴大變異來源是所有作物育種研究的重要課題。苧麻(Boehmeria nivea(L.)Gaud)是我國重要的韌皮纖維作物之一，栽培和加工歷史悠久。隨著人們生活水平的提高，對苧麻品質方面要求越來越高，這就需要苧麻在育種方面有一個新的飛躍，然而就苧麻的目前育種而言，育種手段比較單一，育種周期較長；另一方面，也出現(xiàn)了種質資源貧乏的現(xiàn)象，單靠常規(guī)的雜交手段已很難獲得理想材料。而近幾十年發(fā)展起來的組織培養(yǎng)技術，為苧麻創(chuàng)造優(yōu)

2、異新種質開拓了一條新途徑，特別是利用體細胞無性系變異來培育新品種在其他作物上取得的成功，更是給苧麻的優(yōu)質品種繁育提供了美好前景。 本研究從建立穩(wěn)定高效的再生體系著手，分別建立了苧麻莖尖快速繁殖再生系統(tǒng)；苧麻葉片愈傷組織組織誘導、分化再生系統(tǒng)；并對苧麻的再生植株進行了了分子水平和形態(tài)學方面的變異進行了初步分析，主要研究結果如下： 1.建立了苧麻莖尖快速繁殖的再生系統(tǒng)：即取生長健壯的莖尖，先用75％酒精浸泡30 sec，然后

3、用0.05％HgCl<,25>對莖尖消毒8 min，再用無菌水沖洗4-5次共15min。然后將由此消毒的莖尖剝取5 mm左右放入MS+1.0 mg/L 6-BA的固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。由此成活的芽苗生長健壯，且在此培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)一個月后試管苗可以增殖6倍左右。 2.建立了苧麻葉片愈傷組織的誘導、分化的再生系統(tǒng)：即先在MS+0.5 mg/LTDZ+0.5 mg/L NAA誘導培養(yǎng)基中誘導出愈傷組織，然后將所誘導的愈傷組織轉入MS+2

4、.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA<,3>分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)20天左右就可以分化出大量的叢生芽苗，分化率最高可達100％。 3.體細胞無性系的DNA水平變異模式：苧麻不同品種間的變異率不同，莖尖再生植株發(fā)生變異的頻率高于葉片愈傷組織再生植株，且二者隨著培養(yǎng)時間的延長，變異率呈上升趨勢，其中在影響其變異的外在培養(yǎng)條件中以激素最為顯著，即在一定范圍內隨著激素TDZ濃度增加和細胞分裂素6-BA濃度的降低其變異頻率會增大。