苧麻體細(xì)胞無(wú)性變異的RAPD分析與形態(tài)學(xué)鑒定.pdf

1、搜集和創(chuàng)造新的種質(zhì)資源，擴(kuò)大變異來(lái)源是所有作物育種研究的重要課題。苧麻(Boehmeria nivea(L.)Gaud)是我國(guó)重要的韌皮纖維作物之一，栽培和加工歷史悠久。隨著人們生活水平的提高，對(duì)苧麻品質(zhì)方面要求越來(lái)越高，這就需要苧麻在育種方面有一個(gè)新的飛躍，然而就苧麻的目前育種而言，育種手段比較單一，育種周期較長(zhǎng)；另一方面，也出現(xiàn)了種質(zhì)資源貧乏的現(xiàn)象，單靠常規(guī)的雜交手段已很難獲得理想材料。而近幾十年發(fā)展起來(lái)的組織培養(yǎng)技術(shù)，為苧麻創(chuàng)造優(yōu)

2、異新種質(zhì)開(kāi)拓了一條新途徑，特別是利用體細(xì)胞無(wú)性系變異來(lái)培育新品種在其他作物上取得的成功，更是給苧麻的優(yōu)質(zhì)品種繁育提供了美好前景。 本研究從建立穩(wěn)定高效的再生體系著手，分別建立了苧麻莖尖快速繁殖再生系統(tǒng)；苧麻葉片愈傷組織組織誘導(dǎo)、分化再生系統(tǒng)；并對(duì)苧麻的再生植株進(jìn)行了了分子水平和形態(tài)學(xué)方面的變異進(jìn)行了初步分析，主要研究結(jié)果如下： 1.建立了苧麻莖尖快速繁殖的再生系統(tǒng)：即取生長(zhǎng)健壯的莖尖，先用75％酒精浸泡30 sec，然后

3、用0.05％HgCl<,25>對(duì)莖尖消毒8 min，再用無(wú)菌水沖洗4-5次共15min。然后將由此消毒的莖尖剝?nèi)? mm左右放入MS+1.0 mg/L 6-BA的固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。由此成活的芽苗生長(zhǎng)健壯，且在此培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)一個(gè)月后試管苗可以增殖6倍左右。 2.建立了苧麻葉片愈傷組織的誘導(dǎo)、分化的再生系統(tǒng)：即先在MS+0.5 mg/LTDZ+0.5 mg/L NAA誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)出愈傷組織，然后將所誘導(dǎo)的愈傷組織轉(zhuǎn)入MS+2

4、.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA<,3>分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)20天左右就可以分化出大量的叢生芽苗，分化率最高可達(dá)100％。 3.體細(xì)胞無(wú)性系的DNA水平變異模式：苧麻不同品種間的變異率不同，莖尖再生植株發(fā)生變異的頻率高于葉片愈傷組織再生植株，且二者隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，變異率呈上升趨勢(shì)，其中在影響其變異的外在培養(yǎng)條件中以激素最為顯著，即在一定范圍內(nèi)隨著激素TDZ濃度增加和細(xì)胞分裂素6-BA濃度的降低其變異頻率會(huì)增大。