精子形態(tài)學(xué)的分析

1、精液形態(tài)學(xué)分析及其意義,,精子形態(tài)學(xué)研究的原因,隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的發(fā)展，男科學(xué)的迅速崛起，以及不育癥的患者增加，簡單精液常規(guī)檢查已經(jīng)不能滿足臨床發(fā)展的需要，也不能全面、客觀地反映患者的真實(shí)情況，更不能評價(jià)睪丸功能。Guzick DS等建議醫(yī)學(xué)界修改男性不育癥的檢查診斷標(biāo)準(zhǔn)，提出把精子的形態(tài)來作為反映男性的生育力的一個(gè)重要指標(biāo)。,精子形態(tài)學(xué)的定義,世界衛(wèi)生組織于半個(gè)世紀(jì)以前所定的標(biāo)準(zhǔn)對男性生育能力作了規(guī)定，特別強(qiáng)調(diào)了精子形態(tài)學(xué)是最能夠反映男性

2、生育力的一項(xiàng)重要指標(biāo)。強(qiáng)調(diào)精子形態(tài)學(xué)需要經(jīng)過染色鑒別.,學(xué)科意義,為臨床提供確切的診斷依據(jù)精液不染色檢查中往往將精液中的"圓形細(xì)胞(是白細(xì)胞和不成熟生精細(xì)胞的統(tǒng)稱)"都報(bào)告為"白細(xì)胞"，實(shí)際上這些圓形細(xì)胞大約70%是生精細(xì)胞，我們?nèi)狈﹁b別能力，造成臨床誤診，我們必須重視用染色方法，油鏡觀察，不能停留在過去的認(rèn)識和分類，應(yīng)該依精子凋亡形態(tài)和生精細(xì)胞凋亡形態(tài)進(jìn)行分類,學(xué)科學(xué)意義,對精子形態(tài)和生精細(xì)胞

3、的鑒別以及區(qū)分其他細(xì)胞的報(bào)告結(jié)果，藉以評價(jià)睪丸功能，為臨床提供確切的診斷依據(jù)。過氧化物酶陽性的粒細(xì)胞是精液中主要的白細(xì)胞,所以過氧化物酶常規(guī)分析法有助于白細(xì)胞的檢測.,生精細(xì)胞凋亡的研究,患者精液中檢出的異常(缺陷)精子，實(shí)際上是精子在生成過程中，不同類型的凋亡精子，隨著科學(xué)的進(jìn)步，已經(jīng)不能在停留在過去的認(rèn)識和分類上，曹興午教授提出應(yīng)該依精子凋亡形態(tài)進(jìn)行分類，精子凋亡在精子生成過程中是一個(gè)重要特征，自發(fā)的凋亡對維持正常精子數(shù)量非常重要

4、,生精細(xì)胞凋亡的研究,生精細(xì)胞凋亡是許多哺乳類動(dòng)物在正常生精過程一種"優(yōu)勝劣汰""保持平衡"的增殖機(jī)制，不僅發(fā)生在睪丸的生精階段，就是在精子生成以后也仍然發(fā)生精子凋亡。而誘發(fā)過多的生精細(xì)胞凋亡是一種異常的病理現(xiàn)象，導(dǎo)致過多的精子凋亡與男性不育密切相關(guān)。,臨床意義,1.精索靜脈曲張病人的畸形男性精子增多，提示男性精子在不成熟時(shí)已進(jìn)入男性精液，或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧，或血液帶有

5、毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸，上述原因均有損于男性精子形態(tài)。,臨床意義,2. 精液中凝聚精子增多，提醒生殖道傳染病或免疫功能異常。3. 睪丸曲細(xì)精管生精功能遭到藥物或其他要素影響或損傷時(shí)，精液中可呈現(xiàn)較多病理性未成熟精密胞。,分析方式,精子形態(tài)的主要分析手段精子涂片染色,染色是分析精子形態(tài)的主要手段，正常精子和生理及病理范圍內(nèi)的變異精子也只能通過染色加以分析,,《WHO人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊》(第五版)精子形

6、態(tài)學(xué)分析,概述 正常精子形態(tài)學(xué)分類 異常精子形態(tài)學(xué)分類 正常精子形態(tài)學(xué)評估 異常精子形態(tài)學(xué)評估 多重精子缺陷指數(shù),精子形態(tài),精子形態(tài),使用嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)評估精子形態(tài)的正常率，與其他生育力評價(jià)的終點(diǎn)指標(biāo)（如妊娠等待時(shí)間、體外受精率、妊娠率）有相關(guān)性，因此，評價(jià)精子形態(tài)對判斷生育力有極其重要的意義。,2.13 精子形態(tài),WHO-5手冊描述分類方法的基本依據(jù)，是通過鑒定源自宮頸粘液具有潛在授精能力的亞群精子來定義正常形態(tài)精子

7、。應(yīng)用這些標(biāo)準(zhǔn)，有生育力和不育者正常形態(tài)精子大約0~30%，很少有超過25%。 體外受精、宮腔人工受精、自然受孕的研究中也發(fā)現(xiàn)，正常形態(tài)精子的參考值下限3~5%。,精子發(fā)生,正常精子形態(tài)學(xué),精子包括頭、頸、中段、主段和末段。由于通過光學(xué)顯微鏡很難觀察到精子末段，因此可以認(rèn)為精子是由頭（和頸）和尾（中段和主段）組成。只有頭和尾都正常的精子才認(rèn)為是正常的。 所有處于臨界形態(tài)的精子應(yīng)該認(rèn)為是異常。,精子形態(tài)學(xué)評估存在的困難

8、,缺乏客觀性判讀差異執(zhí)行外部質(zhì)量控制差 WHO-5手冊推薦了簡單區(qū)別精子形態(tài)正?；虍惓５姆诸惙椒?--記錄異常形態(tài)精子的異常部位。只有采用WHO-5嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)，所給出的參考限才有意義。,正常形態(tài)精子,正常精子形態(tài)學(xué),精子頭外形上應(yīng)該是光滑、輪廓規(guī)則，大體上呈橢圓形。頂體區(qū)可清晰分辨，占頭部的40~70%。頂體區(qū)沒有大空泡，并且不超過2個(gè)小空泡，空泡大小不超過頭部的20%。頂體后區(qū)不含任何空泡。,正常精子形態(tài)學(xué),中段應(yīng)該細(xì)長

9、，規(guī)則，大約與頭部長度相等。中段主軸應(yīng)與頭部長軸成一條直線。 殘留胞質(zhì)只有在過量時(shí)才被認(rèn)為是異常的，即胞質(zhì)超過了精子頭大小的1/3時(shí)被認(rèn)為過量殘留胞質(zhì)。,正常精子形態(tài)學(xué),主段應(yīng)該比中段細(xì)，均一，其長約45μm（約為頭部長度的10倍）；尾部應(yīng)沒有顯示鞭毛折斷的銳利折角；主段可以自身彎曲成環(huán)狀。,正常精子形態(tài)學(xué)述評,1. 使用此標(biāo)準(zhǔn)，精子頭部形狀比大小更為重要，除非存在嚴(yán)重缺陷。2. 可借助目鏡測微尺來區(qū)分精子頭部大小正常或異

10、常。,正常精子形態(tài)學(xué)述評,3. 使用計(jì)算機(jī)系統(tǒng)測量77個(gè)經(jīng)巴氏染色的精子的頭部尺寸（重復(fù)測量的差異變異系數(shù)為2-7%）得到以下數(shù)據(jù)：長度的中位數(shù)為4.1μm ，95%可信限區(qū)間為3.7-4.7；寬度的中位數(shù)為2.8μm，95%可信限區(qū)間為2.5-3.2；長寬比的中位數(shù)為1.5，95%可信限區(qū)間為1.3-1.8。,正常精子形態(tài)學(xué)述評,4. 使用同樣的計(jì)算機(jī)系統(tǒng)測量74個(gè)經(jīng)巴氏染色的精子的中段尺寸，得到以下數(shù)據(jù)：長度的中位數(shù)為4.0μm，9

11、5%可信限區(qū)間為3.3-5.2；寬度的中位數(shù)為0.6μm，95%可信限區(qū)間為0.5-0.7。5. 卷尾（﹥360°）可能提示附睪功能障礙。,異常精子形態(tài)學(xué)分類,頭部缺陷：大頭、小頭、錐形頭、梨形頭、圓頭、不定形頭、有空泡的頭（超過2個(gè)空泡，或者未染色的空泡區(qū)域占頭部的20%以上）、頂體后區(qū)有空泡、頂體區(qū)過小或過大（小于頭部的40%，或大于頭部的70%）、雙頭，或上述缺陷的任何組合。,異常精子形態(tài)學(xué)分類,頸部和中段的缺陷

12、：中段非對稱地接在頭部、粗的或不規(guī)則、銳角彎曲、異常細(xì)的中段，或上述缺陷的任何組合。主段缺陷：短尾、多尾、斷尾、發(fā)卡形平滑彎曲、銳角彎曲、寬度不規(guī)則、卷曲，或上述缺陷的任何組合。,異常精子形態(tài)學(xué)分類,過量殘留胞質(zhì)（ERC）：這是異常精子發(fā)生過程產(chǎn)生的異常精子所伴有的。這類異常精子的特征是含有大量不規(guī)則已染色的細(xì)胞質(zhì)，胞質(zhì)的大小超過精子頭部的三分之一，通常同時(shí)有中段缺陷。這種異常的過量胞質(zhì)不應(yīng)該被認(rèn)為是胞質(zhì)小滴。,異常精子

13、形態(tài)學(xué)分類,圖譜,,圖譜（P70-P93）,圖譜（P70-P93）,,異常精子的形態(tài)常與感染、外傷、雄激素變化或化學(xué)藥物及遺傳因素影響有關(guān)。生殖系統(tǒng)的非特異性感染，可導(dǎo)致尖頭和不定形頭精子比例增多。精索靜脈曲張由于靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧，可引起精子頭部或體部腫脹或缺陷。服用激素或某些化學(xué)藥品，精液中會(huì)出現(xiàn)不成熟的精子及其他生殖細(xì)胞和精子細(xì)胞體的胞質(zhì)小滴。,正常精子形態(tài)的評估,最好在另一張重復(fù)涂片上，但是也可選擇同一

14、張涂片，重復(fù)評估至少200個(gè)精子，以達(dá)到可接受的低抽樣誤差。只評估具有頭部和尾部的完整精子。 僅評估具有頭部和尾部的完整精子，不計(jì)數(shù)未成熟的生殖細(xì)胞（圓細(xì)胞）。,正常精子形態(tài)的評估,不應(yīng)評估重疊的精子和頭部枕在其他顆粒邊的精子。 以最接近的整數(shù)報(bào)告平均正常形態(tài)精子百分率。習(xí)慣是調(diào)整0.5%至最接近的偶數(shù)。注意所調(diào)的百分率不能加升至100%。,正常精子形態(tài)的評估,比較兩份獨(dú)立重復(fù)評估獲得的兩個(gè)正常形態(tài)精子百分率，計(jì)算平

15、均值及差異值。如果差異值是可接受的，報(bào)告百分率的平均值；如果差異值太大，則重復(fù)評估相同的涂片。 當(dāng)兩個(gè)百分率間的差異大于可接受差異，放棄第一次的兩個(gè)值并重新評估。（不要計(jì)數(shù)第三個(gè)樣本，?。硞€(gè)值的平均值，或者?。硞€(gè)值中最相近的兩個(gè)值的平均值。）,正常精子形態(tài)的評估,表2-1 重復(fù)計(jì)數(shù)200個(gè)精子（共計(jì)數(shù)400個(gè)精子）正常形態(tài)百分率的平均值及兩次百分率之間的可接受差異,參考值下限（P58）,正常形態(tài)精子的參考值下限為4%，精液中，形

16、態(tài)正常精子的總數(shù)更具有生物學(xué)意義。例（39 X 106）X 4% = 1.56 X 106/每次射精 由于每種缺陷是被單獨(dú)計(jì)數(shù)，并且有些精子具有多種類型缺陷，所以這些種類的缺陷相加不等于100%。,第五版知識更新,1 世界衛(wèi)生組織(WHO)（第四版活力分級）推薦將精子活動(dòng)力分為4級：①精子活動(dòng)好，運(yùn)動(dòng)迅速，活潑有力，直線向前運(yùn)動(dòng)；②精子活動(dòng)較好，運(yùn)動(dòng)速度尚可，游動(dòng)方向不定，呈直線或非直線運(yùn)動(dòng)，帶有回旋；③精子運(yùn)動(dòng)不良，運(yùn)動(dòng)遲緩

17、，原地打轉(zhuǎn)或抖動(dòng)，向前運(yùn)動(dòng)能力差；④死精子，精子完全不活動(dòng),第五版知識更新,世界衛(wèi)生組織(WHO)（第五版精子活力分級）1.前向運(yùn)動(dòng)：精子主動(dòng)地呈直線或沿一大圓周運(yùn)動(dòng)，不管其速度如何。2.非前向運(yùn)動(dòng)：所有其它非前向運(yùn)動(dòng)的形式，如以小圓周泳動(dòng)，尾部動(dòng)力不能趨勢頭部移動(dòng)，或者只能觀察到尾部擺動(dòng)！3.不活動(dòng)：沒有動(dòng)力。,,精子濃度：（每單位體積數(shù)目時(shí))，不應(yīng)使用術(shù)語：精子密度（每單位體積質(zhì)量）,結(jié)合我院我科實(shí)際情況新項(xiàng)目的開展供科室參考