絡(luò)合銅復(fù)合材料對(duì)大鼠精子功能及形態(tài)學(xué)影響.pdf

1、宮內(nèi)節(jié)育器(IUD)是一種安全、有效、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、可逆的節(jié)育方法，也是全球使用最廣泛的節(jié)育方法之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國使用IUD避孕的婦女總?cè)藬?shù)占世界的80％，是世界上使用IUD 最多的國家。帶銅IUD 在子宮腔內(nèi)能持續(xù)地釋放具有生物活性的銅離子，銅離子具有較強(qiáng)的抗生育作用。 帶銅IUD 避孕效果與銅的表面積呈正比，但銅面積過大時(shí)，副反應(yīng)也越大。TCu380A 是到目前為止最有效避孕效果的宮內(nèi)節(jié)育器。但由于疼痛、出血等原因，其停止使用

2、取出率較高。 絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料（由華中科技大學(xué)材料學(xué)院研制而成）是一種新型可控制銅離子釋放的高分子復(fù)合材料，它由聚乙烯醇，二氧化硅，氯化銅多種材料絡(luò)合而成。其中，銅離子和聚乙烯醇之間形成了絡(luò)合銅，通過絡(luò)合平衡來釋放銅離子，而不是銅的腐蝕來釋放銅離子。從而避免的銅的暴釋現(xiàn)象，并增加了有效的銅離子。 本實(shí)驗(yàn)將分為三部分，探討絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料體外對(duì)大鼠精子功能及形態(tài)學(xué)影響及其作用機(jī)制。 第一部分

3、、絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料對(duì)大鼠精子功能的影響 目的:研究絡(luò)合銅復(fù)合材料作用后精子的活率和存活率，探討絡(luò)合銅復(fù)合材料對(duì)大鼠精子運(yùn)動(dòng)功能的影響。 方法:健康、潔凈、成熟雄性Wistar 大鼠10 只，體重為450±20g，實(shí)驗(yàn)分組為正常對(duì)照組、壬苯醇醚（2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml）5組、絡(luò)合銅復(fù)合材料（2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml

4、）5組。藥物作用精子一段時(shí)間后，分別在4個(gè)時(shí)間點(diǎn)，觀察精子的的活率及存活率。 結(jié)果：所有濃度絡(luò)合銅復(fù)合材料組作用后的精子活率和存活率與正常組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與對(duì)應(yīng)濃度的壬苯醇醚組之間比較無統(tǒng)計(jì)意義。能在30min 內(nèi)完全抑制精子的活動(dòng)的絡(luò)合銅復(fù)合材料最低有效濃度為4μg/ml，能在1h 完全殺死精子的絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料最低有效濃度為16μg/ml。 結(jié)論: 絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料能在短時(shí)間內(nèi)抑制精子

5、活力并殺死精子。 第二部分、絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料對(duì)大鼠精子形態(tài)的影響 目的：研究絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料對(duì)大鼠精子的光鏡及超微結(jié)構(gòu)的影響，探討絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料對(duì)大鼠精子的作用部位。 方法：動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)分組同第一部分。采用光鏡觀察正常組和各組藥物作用后HE 染色大鼠精子形態(tài)（正常形態(tài)精子、頭部缺陷精子、頸段缺陷精子、中段缺陷、主段缺陷精子），并計(jì)算精子缺陷指數(shù)（精子總?cè)毕葜笖?shù)、有頭無尾精子缺陷

6、指數(shù)、成角精子缺陷指數(shù)、頸段斷裂精子缺陷指數(shù)、尾部卷曲精子缺陷指數(shù)）。通過透射電鏡技術(shù)檢查精子的超微結(jié)構(gòu)的改變。 結(jié)果：光鏡下可見，經(jīng)絡(luò)合銅復(fù)合材料作用后的大鼠精子出現(xiàn)頭尾分離、頸段斷裂、尾部成角、尾部卷曲等異常形態(tài)。絡(luò)合銅復(fù)合材料(32μg/ml、16μg/ml、8μg/ml）作用后的精子缺陷指數(shù)與正常組的精子缺陷指數(shù)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，絡(luò)合銅復(fù)合材料與精子作用后的精子缺陷指數(shù)與對(duì)應(yīng)濃度的壬苯醇醚作用后精子缺陷指數(shù)之間比較無統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義。透射電鏡下觀察，經(jīng)絡(luò)合銅復(fù)合材料作用后，可見精子頭部核內(nèi)有2-3個(gè)透亮小區(qū)，頂體完整，位于核前端，頂體內(nèi)膜與核膜間頂體下區(qū)不明顯。頭部前半質(zhì)膜破損，頂體外膜表面附有細(xì)小銅離子顆粒。中段質(zhì)膜殘缺不全，銅離子附著于線粒鞘內(nèi)外面，線粒體內(nèi)嵴膜模糊。軸絲和外周致密纖維結(jié)構(gòu)及排列尚正常。主段質(zhì)膜腫脹，其與纖維鞘間隙增大，未見高電子密度銅顆粒附著。末段軸絲、纖維鞘和質(zhì)膜基本正常。 結(jié)論:光鏡和電鏡結(jié)果均提示，絡(luò)合銅復(fù)合材料作用后精子

8、出現(xiàn)頸部和尾部缺陷，同時(shí)精子中段、主段質(zhì)膜以及線粒體鞘也發(fā)生改變，這些可能是導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)能力低下的原因之一。 第三部分、絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料對(duì)大鼠精子細(xì)胞膜ATPase活性的影響 目的：研究絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料對(duì)大鼠精子細(xì)胞膜的Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP 酶的影響，來探討絡(luò)合銅/低密度聚乙烯復(fù)合材料IUD 對(duì)大鼠精子的作用機(jī)制。 方法：動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)分組同第一部分。采用比色法檢

9、測(cè)細(xì)胞膜上的Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP 酶的活性影響。 結(jié)果：所有濃度絡(luò)合銅復(fù)合材料組的精子細(xì)胞膜Na+-K+-ATP 酶的活性與正常組之間比較有統(tǒng)計(jì)意義，高、中濃度絡(luò)合銅復(fù)合材料組的精子細(xì)胞膜Na+-K+-ATP 酶的活性與對(duì)應(yīng)濃度壬苯醇醚組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。高、中濃度絡(luò)合銅復(fù)合材料組的精子細(xì)胞膜Ca2+-Mg2+-ATPase的活性與正常組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。高劑量絡(luò)合銅復(fù)合材料組的精子細(xì)胞膜Ca2