蜂毒肽的分離純化及其抗輻射作用機(jī)理研究.pdf

1、本文所述的蜂毒肽是通過(guò)對(duì)使用OF-1型超級(jí)蜜蜂電子自動(dòng)取毒器采自福建農(nóng)林大學(xué)蜂學(xué)學(xué)院教學(xué)蜂場(chǎng)的意大利蜜蜂蜂毒，經(jīng)葡聚糖凝膠層析等分離純化后，再經(jīng)電泳對(duì)組分進(jìn)行鑒定，證實(shí)其為電泳級(jí)純度。通過(guò)腹腔注射蜂毒肽小鼠經(jīng)鈷60輻射后的存活時(shí)間、骨髓微核致變、染色體畸變和單細(xì)胞凝膠電泳(SCGE)等試驗(yàn)結(jié)果來(lái)評(píng)估蜂毒肽的抗輻射作用。采用MTT法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組小鼠脾細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，以鄰苯三酚自氧化體系和Fenton體系測(cè)定蜂毒肽對(duì)超氧陰離子和羥自由基的清除

2、作用，探究了蜂毒肽的抗輻射主要作用機(jī)理。所得結(jié)果如下： 1．蜂毒肽的抗輻射作用結(jié)果顯示，蜂毒肽可以有效提高受照射小鼠的平均存活時(shí)間和存活率，當(dāng)照射前給小鼠腹腔注射低、中、高劑量(0.6、0.8、1.0mg/Kg體重)蜂毒肽可以使小鼠的存活時(shí)間提高3.2、12.4、5.7天，存活率提高21.9％，52.6％，28.3％。蜂毒肽使受試組小鼠骨髓細(xì)胞微核率分別降低3.36‰、8.09‰、8.15‰，分別降低了26.4％、63.5％、6

3、4.0％，染色體畸變率分別下降了7.8％、17.1％、17.4％。，當(dāng)照射前24小時(shí)給小鼠腹腔注射0.8mg/kg蜂毒肽時(shí)表現(xiàn)最佳，可以使小鼠的存活時(shí)間提高12.4．天，存活率提高52.6％；小鼠的骨髓細(xì)胞微核率較空白對(duì)照組降低了8.09‰，下降率達(dá)64％；而受試組小鼠的染色體畸變率比對(duì)照組下降了17.1％。 SCGE試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，注射蜂毒肽的試驗(yàn)組骨髓細(xì)胞彗星細(xì)胞率明顯高于未加入蜂毒肽的空白試驗(yàn)組，蜂毒肽使骨髓細(xì)胞彗星細(xì)胞率分別降

4、低32.5％，57.6％，44.81％。沒(méi)有注射蜂毒肽的空白對(duì)照組小鼠的骨髓細(xì)胞的彗尾長(zhǎng)度明顯高于其他實(shí)驗(yàn)組，注射蜂毒肽的小鼠骨髓細(xì)胞的彗尾長(zhǎng)度比空白分別降低34.2％，40.3％，37.2％。證明了蜂毒肽可以有效的保護(hù)受照射小鼠的骨髓細(xì)胞DNA，減少DNA的輻射損傷。 2．蜂毒肽的抗輻射作用機(jī)理受照射24小時(shí)后的小鼠的脾細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，用MTT法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組小鼠脾細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，結(jié)果顯示：照射前加入蜂毒肽可以提高小鼠脾細(xì)胞轉(zhuǎn)化

5、率，低劑量(0.6mg/kg)的肽可以使小鼠脾細(xì)胞轉(zhuǎn)化率提高9.1％，中等劑量組(0.8mg/kg)的小鼠脾細(xì)胞轉(zhuǎn)化率比空白組高了12.9％，高劑量組(1.0mg/Kg)比空白組提高了15％。蜂毒肽抗輻射的作用機(jī)制之一是促進(jìn)脾細(xì)胞的增殖，提高機(jī)體免疫力。以鄰苯三酚自氧化體系和Fenton體系測(cè)定蜂毒肽對(duì)超氧陰離子和羥自由基的清除作用。試驗(yàn)結(jié)果顯示，在反應(yīng)體系中加入10μl濃度為10mg/ml、20mg/ml、30mg/ml的蜂毒肽時(shí)對(duì)超