蜂毒肽分離純化與體內(nèi)外抗HSV-1病毒作用研究.pdf

1、近年來(lái)由單純皰疹病毒I型引起的疾病發(fā)病率不斷上升且伴有病毒耐藥株的出現(xiàn),為此我們開展了蜂毒肽抗HSV-1作用的研究。研究結(jié)果如下:
　　 利用QF-1型超級(jí)蜜蜂電子自動(dòng)取毒器采集意蜂蜂毒,通過(guò)葡聚糖凝膠層析分離純化,再進(jìn)行SDS-PAGE電泳鑒定,證實(shí)其為電泳級(jí)純度的蜂毒肽,供后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
　　 利用非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero細(xì)胞)培養(yǎng)體外模型,采用細(xì)胞病變法,阿昔洛韋(ACV)作對(duì)照,探討蜂毒肽有無(wú)體外抗HSV-1活性

2、。結(jié)果顯示,通過(guò)MTT法測(cè)得蜂毒肽對(duì)Vero細(xì)胞的半數(shù)毒性濃度(CC50)為10-2.1mg/100μL。當(dāng)利用100μL9CC50的蜂毒肽時(shí)能夠使病毒抑制率達(dá)到66.51％。病毒的半數(shù)感染量(TCID50)為10-5.2/100μL。用HSV-1病毒建立小鼠腦炎模型,以ACV作為陽(yáng)性對(duì)照物,對(duì)蜂毒肽體內(nèi)抗HSV-1病毒的活性進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果顯示,HSV-1病毒對(duì)小鼠的半數(shù)致死量(LD50)為10-3mg/kg;蜂毒肽可以使染毒小鼠存活率

3、從20％提高到50％,具有明顯抑制HSV-1病毒的作用,并具有延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間的作用。
　　 設(shè)計(jì)四組蜂毒肽抗HSV-1病毒作用靶點(diǎn)作為四個(gè)試驗(yàn)組,分別探討蜂毒肽對(duì)HSV-1病毒的直接作用、病毒的吸附、合成及釋放是否有影響。結(jié)果顯示:(1)四個(gè)濃度梯度1CC50,3CC50,6CC50,9CC50的蜂毒肽對(duì)HSV-1病毒的吸附均有抑制作用,抑制率分別為31.25％,32.92％,32.92％,32.08％,其中蜂毒肽對(duì)HSV-1

4、病毒的最高抑制率為32.92％;(2)1CC50,3CC50,6CC50,9CC50四個(gè)濃度梯度的蜂毒肽對(duì)HSV-1病毒的合成均有抑制作用,抑制率分別為29.05％,29.91％,31.69％,33.06％,其中蜂毒肽對(duì)HSV-1病毒合成的最高抑制率為33.06％;(3)1CC50,3CC50,6CC50,9CC50四個(gè)濃度梯度的蜂毒肽對(duì)HSV-1病毒的釋放均有抑制作用,抑制率分別為29.31％,18.37％,13.28％,10.70％