重組藍藻抗病毒蛋白-N抗HSV-1活性的研究.pdf

1、目的: 探討重組藍藻抗病毒蛋白N抗單純皰疹病毒1型(HSV-1)的作用及可能機制，為進一步開發(fā)該藥提供理論依據(jù)。 方法: 選用HSV-1標準株(SM44株)進行了CV-N體內及體外病毒活性的研究。體外實驗在Vero細胞中進行，以不同劑量的CV-N作用于HSV-1復制周期的各個階段，通過觀察藥物毒性、細胞病變效應(CPE)、MTT比色法檢測細胞增殖，熒光定量PCR(FQ-PCR)及原位分子雜交，判斷CV-N的細胞毒性及其抗病毒效果

2、。體內實驗以HSV-1進行腦內局部接種，制備小鼠皰疹性腦炎模型，觀察CV-N對感染小鼠的治療作用，以每組小鼠死亡率和平均存活日作為療效指標，同時取腦組織標本進行HE染色觀察細胞病變。 結果: CV-N對Vero細胞的增殖無明顯作用，對Vero細胞毒性較低，半數(shù)毒性濃度TC50為359μg/ml；CV-N對HSV-1無直接抑制作用，可干擾HSV-1向Vero細胞的吸附，但沒有達到完全抑制；CV-N可有效地抑制病毒的復制，使感染HS

3、V-1的Vero細胞存活率明顯提高。FQ-PCR結果顯示表明隨著CV-N濃度及作用時間的增加，CV-N對HSV-DNA的抑制作用明顯增強，具有良好的劑量和時效關系。原位雜交結果表明CV-N作用的HSV-1感染組，其糖蛋白gB mRNA的表達明顯低于病毒對照組，隨著作用時間的增加，其抑制作用明顯增加。體內實驗結果表明CV-N可以顯著提高皰疹性腦炎小鼠的存活率，并減輕腦組織的病理改變。 結論: CV-N抗HSV-1作用機制與阻滯病毒