重組人中性粒細(xì)胞多肽-,1,3-的制備及其體外抗HIV-1，HSV-1作用的初步研究.pdf

1、 近二十年來(lái)，艾滋病(AIDS)已成為嚴(yán)重危害全人類健康的傳染病之一。近年廣泛實(shí)施的高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(HAART)雖然明顯提高了抗HIV感染的療效，但存在病毒變異相關(guān)耐藥性，毒副作用大、價(jià)格昂貴等缺點(diǎn)，尤其是不能完全清除病毒，因此迫切需要開(kāi)發(fā)新的高效、作用于多環(huán)節(jié)的抗HIV-1藥物。本文應(yīng)用分子克隆技術(shù)將人中性粒細(xì)胞多肽1，3(HNP1,3)cDNA克隆到真核表達(dá)載體上，用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將重組質(zhì)粒與含dhfr基因的標(biāo)志質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染

2、CHO-dhfrˉ，經(jīng)MTX壓力選擇系統(tǒng)進(jìn)行基因擴(kuò)增表達(dá)，獲得有較高生物學(xué)活性的分泌型HNP1與HNP3；并以HIV復(fù)制過(guò)程中的關(guān)鍵酶逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)為檢測(cè)指標(biāo)，通過(guò)體外感染實(shí)驗(yàn)，對(duì)HNP1,3在不同環(huán)節(jié)對(duì)HIV-1急性感染的抑制作用進(jìn)行了研究，旨在明確了HNP1,3的抗HIV-1作用和其可能作用靶點(diǎn)；同時(shí)還測(cè)定了HNP1,3針對(duì)單純皰疹病毒-Ⅰ型(HSV-1)的活 性，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)針對(duì)伴多重感染的艾滋病患者的抗病毒藥物提供了實(shí)驗(yàn)