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文檔簡介
1、背景與目的:眼部主要是單純皰疹病毒I型(Herpessimplexvirus,HSV-1)感染,以往的研究發(fā)現(xiàn)HSV-1病毒主要潛伏在三叉神經(jīng)節(jié)、頸交感神經(jīng)節(jié)等部位,后來在鼠的虹膜、睫狀體、頸上神經(jīng)節(jié)、人的角膜、杏仁體、海馬、腦干等部位發(fā)現(xiàn)HSV-1,近年來在睫狀神經(jīng)節(jié)、翳狀胬肉也發(fā)現(xiàn)了HSV-1。已經(jīng)證實角膜是HSV-1的另一個眼部潛伏部位。三叉神經(jīng)支配角膜、虹膜、睫狀體。虹膜、睫狀體是否同角膜一樣存在HSV-1潛伏,目前尚不明確;H
2、SV-1可引起急性視網(wǎng)膜壞死綜合征,視網(wǎng)膜是否是HSV-1潛伏的部位,目前缺乏研究。本研究采用細胞培養(yǎng)、免疫組化和PCR的方法,探討正常人虹膜、睫狀體、視網(wǎng)膜是否存在HSV-1的DNA和潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄本功能片段(Latencyassociatedtranscript,LAT)。 方法:采用正常健康志愿者捐獻的新鮮眼球20個,在穿透性角膜移植手術(shù)后的供體眼球上,取1/3眼球組織進行免疫組化染色,排除HSV-1急性感染。從免疫組化染色
3、陰性的眼球中取出剩余的虹膜、睫狀體、視網(wǎng)膜,分別將每個眼球的虹膜、睫狀體、視網(wǎng)膜組織的1/3進行離心,取上清液與Vero細胞共培養(yǎng),并盲傳三代,檢查有無活性HSV-1存在;另外2/3組織提取DNA作PCR和凝膠電泳檢測有無HSV-1的DNA和LAT。 結(jié)果:1.20個標本免疫組化染色皆陰性,無HSV-1急性感染。 2.Vero細胞分別與虹膜、睫狀體、視網(wǎng)膜組織上清液共培養(yǎng),并盲傳三代結(jié)果為陰性,未觀察到細胞病理學(xué)改變,對
4、照組有陽性表現(xiàn),表現(xiàn)為Vero細胞氣球樣變、核固縮、多核巨細胞甚至細胞懸浮死亡。 3.PCR檢測20個人的虹膜、睫狀體、視網(wǎng)膜標本中,4個睫狀體標本的HSV-1DNA陽性,3個視網(wǎng)膜標本的HSV-1DNA陽性,其他虹膜、睫狀體、視網(wǎng)膜標本PCR檢測HSV-1DNA陰性。所有的虹膜、睫狀體、視網(wǎng)膜標本HSV-1LAT結(jié)果陰性。 結(jié)論:正常人眼睫狀體、視網(wǎng)膜存在HSV-1DNA,提示在睫狀體、視網(wǎng)膜可能有HSV-1的潛伏,成
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