大鼠海馬膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)牽張損傷模型的建立及NAAG的神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)研究.pdf

1、近年來N-乙酰天冬氨酰谷氨酸（NAAG）在神經(jīng)保護(hù)方面的作用逐漸得到關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用Ellis細(xì)胞牽張損傷模型體外模擬臨床輕度腦外傷，分別觀察NAAG 在NAAG 肽酶不同活性狀態(tài)下對神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用的變化，為探索新的腦外傷保護(hù)策略提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第一部分、大鼠海馬膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)牽張損傷模型的建立 目的:建立大鼠海馬膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)牽張損傷模型。 方法:TBI組采用CIC Ⅱ型細(xì)胞損傷裝置，根據(jù)Ellis方法建立大鼠

2、海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞體外牽張損傷模型，損傷程度分輕、中、重三級。Sham TBI組不予損傷，其余操作同TBI組。分別在2h和24h檢測細(xì)胞乳酸脫氫酶釋放量，并通過碘化丙啶熒光染色觀察細(xì)胞損傷情況。 結(jié)果:細(xì)胞培液中乳酸脫氫酶釋放量隨著損傷程度加重而增高。 結(jié)論:Ellis細(xì)胞牽張損傷模型使用方便，可重復(fù)性好，適于進(jìn)行神經(jīng)細(xì)胞機(jī)械性體外損傷的研究。 第二部分　NAAG對體外培養(yǎng)大鼠海馬膠質(zhì)細(xì)胞牽張損傷的神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)研究

3、 目的:研究NAAG對大鼠海馬膠質(zhì)細(xì)胞體外牽張損傷的保護(hù)效應(yīng)。 方法:建立大鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞體外輕度牽張損傷模型。NAAG肽酶活性存在組牽張損傷后加入不同濃度NAAG，NAAG肽酶活性抑制組以磷酸鹽抑制NAAG肽酶活性，牽張損傷后加入不同濃度NAAG。并分別設(shè)立對照組。 結(jié)果:加入NAAG后NAAG肽酶活性存在組細(xì)胞損傷程度加重，活性抑制組細(xì)胞損傷程度減輕。 結(jié)論:NAAG在NAAG肽酶活性被抑制情況下