單核細(xì)胞增生性李斯特桿菌單克隆抗體的制備.pdf

1、近年來(lái)，微生物污染所造成的食源性疾病和潛在的健康危害已成為世界各國(guó)主要的公共衛(wèi)生問(wèn)題．目前，我國(guó)食品中致病菌的檢測(cè)手段主要采用傳統(tǒng)的國(guó)標(biāo)方法，其檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、靈敏性不高，不利于食源性疾病的預(yù)防和控制，對(duì)我國(guó)消費(fèi)者的健康造成嚴(yán)重威脅。 本研究采用滅活后的單核細(xì)胞增生性李斯特桿菌全菌免疫雌性BALB/c小鼠，待小鼠尾靜脈全血效價(jià)達(dá)到1：10000以上，取其脾臟與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞按常規(guī)方法進(jìn)行細(xì)胞融合，脾細(xì)胞與SP2/0骨髓癌細(xì)胞的

2、比例為8：1，經(jīng)間接ELISA方法進(jìn)行篩選，對(duì)強(qiáng)陽(yáng)性單克隆孔進(jìn)行克隆，經(jīng)過(guò)5次有限稀釋法克隆后，共獲得4株能穩(wěn)定分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株，分別命名為1B9、2C3、4D8和4H6，對(duì)其亞類(lèi)進(jìn)行鑒定，分別為IgG1、IgG1、IgG2b和IgG1；四代腹水效價(jià)相差不大，說(shuō)明分泌抗體能力比較穩(wěn)定；染色體鑒定，分別為104、106、103和107條染色體，符合雜交瘤細(xì)胞的特性；配對(duì)實(shí)驗(yàn)顯示1B9和2C3，4D8和1B9，4D8和2C3，4