一種新的兔蛛網(wǎng)膜下腔出血模型建立及腦血管痙攣的初步研究.pdf

1、蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)絕大多數(shù)系腦動脈瘤破裂所致，其死亡率達到22～25％。 SAH最常見的并發(fā)癥是腦血管痙攣(CVS)，由其引起的腦缺血和腦梗死是致殘和致死的重要原因之一。迄今為止，CVS的治療仍然十分棘手。盡管在CVS的基礎(chǔ)實驗上作了大量深入研究并取得了諸多突破，但在臨床上仍難以取得令人滿意的療效，對于CVS的發(fā)生機制及防治措施尚需深入研究。本課題擬建立一種和顱內(nèi)動脈破裂出血引起SAH相似病理過程的動物模型，從而進一步探明CVS發(fā)

2、生機制，尋找能準確預(yù)示CVS發(fā)生的可靠指標，并在此基礎(chǔ)上尋找更加有效的抗CVS的藥物及治療方法。 第一部分兔蛛網(wǎng)膜下腔出血模型的建立 目的:建立一種能更接近人腦動脈瘤破裂引起SAH過程的動物模型，進一步探明CVS發(fā)生機制。 方法:通過介入法經(jīng)股動脈路徑穿刺兔頸內(nèi)動脈，造成SAH，然后將60只實驗兔分按各時間點(對照組、假手術(shù)組、術(shù)后0h、3h、6h、12h、1d、3d、7d、14d)分成10組，每組6例，行腦血管

3、造影，然后灌注-固定，處死后取基底動脈切片常規(guī)行HE染色觀察，通過圖像分析系統(tǒng)分析，測定動脈內(nèi)徑及血管壁厚度。 結(jié)果:兔血管內(nèi)穿刺法制作的SAH模型呈急性期腦血管痙攣(SAH后12h)和遲發(fā)性腦血管痙攣(SAH后7d)雙相改變。 結(jié)論:此動物模型能較好地模擬動脈瘤性SAH后血管痙攣改變的病理過程。 第二部分腦血管痙攣過程中血管內(nèi)皮增生機制的研究 目的:探討血管內(nèi)皮增生機制在SAH后CVS形成中的作用。

4、 方法:將60只實驗兔按各時間點(對照組、假手術(shù)組、術(shù)后0h、3h、6h、12h、1d、3d、7d、14d)分組，每組6例，留取實驗兔靜脈血，利用ELISA法檢測血清IGF-1、FGF、TGF-β1等指標，進行統(tǒng)計學(xué)分析。動物處死后取基底動脈切片行α-actin免疫組化檢測增殖內(nèi)膜細胞來源，增殖細胞核抗原(PCNA)免疫組化檢測增殖細胞表達情況并計數(shù)。 結(jié)果:SAH后IGF-1、FGF、TGF-β1值表達均有異常，TGF-β

5、1值于SAH后12小時達到谷值、FGF值于SAH后3天達到峰值、IGF-1值于SAH后6小時達到峰值，基底動脈管壁的PCNA陽性細胞數(shù)至SAH后7天達到峰值，峰值維持到SAH后14天，在遲發(fā)性痙攣期兔腦血管存在血管平滑肌細胞增殖和內(nèi)移。 結(jié)論:血管內(nèi)皮增生參與遲發(fā)性腦血管痙攣過程。 第三部分曲匹地爾防治腦血管痙攣的實驗研究 目的:研究曲匹地爾對不同時期腦血管痙攣的防治作用。 方法:將12只兔于SAH后攝入

6、曲匹地爾，分別于各指標出現(xiàn)峰(谷)值的時間點檢測血清IGF-1(SAH后6h)、FGF(SAH后3d)、TGF-β1(SAH后12h)水平，同時腦血管造影，然后按急性痙攣期(12h)及遲發(fā)性痙攣期(7d)分2組，每組6例，處死獲取基底動脈切片，HE染色觀察測定動脈內(nèi)徑及壁厚，行α-actin及PCNA免疫組化并行PCNA陽性細胞計數(shù)，再將檢測值分別與對應(yīng)時間段SAH兔模型的檢測值進行比較分析。 結(jié)果:曲匹地爾可降低兔SAH后血清