鉤藤堿對(duì)減輕大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)是常見(jiàn)的腦血管意外，多由于腦動(dòng)脈瘤破裂造成，其神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙致死、致殘率相當(dāng)高，發(fā)作早期近35％患者不能生存，多數(shù)生存者發(fā)生腦血管痙攣(cerebral vasospasm,CVS)， CVS是SAH后較為嚴(yán)重及常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，是影響患者生存率及生存質(zhì)量的重要因素。已有研究證實(shí)SAH后CVS的腦血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生凋亡，且p38MAPK通路在腦血管

2、組織中被激活，進(jìn)一步誘導(dǎo)CVS的產(chǎn)生。鉤藤堿（Rhynchophylline，Rhy）是鉤藤（Uncaria）中含量最大的生物堿，有研究證明，Rhy能夠通過(guò)抑制P38MAPK通路抑制NF-kB的表達(dá)。但至今為止，Rhy能否通過(guò)抑制P38MAPK通路抑制SAH后腦血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡以減輕CVS未有文獻(xiàn)報(bào)道。因此，本研究將探討Rhy能否通過(guò)抑制P38MAPK通路來(lái)減輕大鼠SAH后的CVS。
　　方法：
　　成年雄性SD大鼠120只

3、，采用血管內(nèi)刺破法建立SAH模型。將動(dòng)物隨機(jī)分為三組，即假手術(shù)（Sham）組、SAH模型（SAH+N.S）組（SAH后腹腔給予生理鹽水1mL）和Rhy給藥組（SAH+Rhy10mg/kg）（即SAH模型后立即腹腔給予鉤藤堿10mg/kg1mL），24h后通過(guò)磁共振成像（magnetic resonance maging，MRI）測(cè)量大鼠在體基底動(dòng)脈(basilar artery，BA)直徑；并經(jīng)HE染色后，測(cè)量大鼠離體BA的血管內(nèi)徑和血

4、管壁厚度；應(yīng)用Western blotting和免疫熒光染色檢測(cè)不同組大鼠BA的p-p38MAPK、p-p53和cleaved-caspase-3蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　24h后，通過(guò)MRI證實(shí)，Rhy給藥組（SAH+Rhy10mg/kg）與SAH模型組（SAH+N.S）比較，Rhy可明顯增加BA的血管直徑（P<0.05）；經(jīng)HE染色知Rhy可明顯增加BA的血管內(nèi)徑并顯著減小BA血管內(nèi)壁厚度（P<0.05）；通過(guò)W

5、estern blotting結(jié)果證實(shí)，Rhy明顯降低了SAH后BA的p-p38 MAPK、p-p53和cleaved-caspase-3蛋白的表達(dá)水平；且通過(guò)免疫熒光染色亦觀察，Rhy能夠明顯減少SAH后BA內(nèi)皮細(xì)胞p-p38MAPK、p-p53和cleaved-caspase-3凋亡蛋白的免疫熒光表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　Rhy能通過(guò)抑制p-p38MAPK、p-p53和cleaved-caspase-3蛋白的表達(dá)水平來(lái)抑制