血管加壓素受體V2、V3在ACTH分泌性腫瘤上的表達及功能.pdf

1、[目的]
　　1.研究人垂體ACTH瘤和異位ACTH綜合征腫瘤細胞上血管加壓素受體V2和V3的表達及功能。
　　2.觀察小鼠垂體ACTH瘤細胞株AtT-20細胞上血管加壓素受體V2和V3的表達。
　　3.研究V2受體激動劑和拮抗劑對小鼠AtT-20細胞分泌ACTH功能的影響，探索V2受體拮抗劑對ACTH分泌性腫瘤可能的治療作用。
　　[方法]
　　1.入選50例垂體ACTH瘤和2例異位ACTH綜合征患者，采

2、用免疫組化的方法對其術(shù)后病理切片進行辣根過氧化物酶染色，觀察ACTH分泌性腫瘤上V2和V3受體的表達情況。
　　2.采用統(tǒng)計學(xué)方法分析入選患者的臨床相關(guān)資料與腫瘤細胞上V2和V3受體表達之間的關(guān)系。
　　3.對其中12例曾行BIPSS+DDAVP試驗的患者，采用多光譜切片流式細胞分析系統(tǒng)對其免疫組化染色切片上V2、V3受體的表達進行定量分析，結(jié)合BIPSS+DDAVP試驗的結(jié)果，分析兩者之間的相關(guān)性。
　　4.體外培養(yǎng)

3、小鼠垂體ACTH瘤細胞株AtT-20，采用Real-time PCR的方法檢測AtT-20細胞上血管加壓素受體V2和V3的表達情況。
　　5.觀察2nM、20nM和200nM三種不同濃度的去氨加壓素對小鼠AtT-20細胞分泌ACTH的作用。
　　6.給予小鼠AtT-20細胞100nM、1μM、10μM三種不同濃度的V2受體拮抗劑托伐普坦干預(yù)，觀察托伐普坦對AtT-20細胞分泌ACTH功能的影響。
　　[結(jié)果]
　

4、　1.50例垂體ACTH瘤上有血管加壓素受體V2和V3的表達，其陽性率分別為62％和76％;V3受體的陽性率高于V2受體。
　　2.2例異位ACTH瘤上V3受體染色皆為陽性，V2受體染色其中1例為陽性，另1例為陰性。
　　3.V2受體染色陰性組和陽性組的患者水腫的表現(xiàn)不同;V3受體染色陰性組和陽性組的患者紫紋的表現(xiàn)不同。兩組患者其余的臨床相關(guān)指標無顯著性差異。
　　4.BIPSS+DDAVP試驗中，中樞及腫瘤優(yōu)勢側(cè)AC

5、TH升高的倍數(shù)與V3受體無關(guān)，而與V2受體的染色強度相關(guān)，其相關(guān)系數(shù)分別為0.686和0.675，有統(tǒng)計學(xué)差異;外周ACTH升高的倍數(shù)與V2、V3受體的表達情況無關(guān)。
　　5.Real-time PCR檢測到體外培養(yǎng)的小鼠垂體ACTH瘤細胞株AtT-20中有血管加壓素V2和V3受體mRNA的表達。
　　6.去氨加壓素藥物干預(yù)實驗觀察到，2nM和20nM濃度的去氨加壓素作用2h后能明顯刺激小鼠AtT-20細胞分泌ACTH;干預(yù)

6、4h后這種刺激作用已經(jīng)逐漸減弱了。
　　7.托伐普坦藥物干預(yù)實驗觀察到，1μM、10μM濃度的托伐普坦能夠不同程度的拮抗去氨加壓素刺激ACTH分泌的作用，并且隨著托伐普坦?jié)舛鹊纳?，其拮抗作用也逐漸增強;而100nM濃度的托伐普坦不能拮抗去氨加壓素的刺激作用。
　　[結(jié)論]
　　1.人垂體ACTH瘤和異位ACTH瘤上有血管加壓素受體V2和V3的表達，V3受體表達的陽性率高于V2受體。
　　2.去氨加壓素通過腫瘤細