人胎肝肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞二維電泳與中醫(yī)肝臟功能理論探討.pdf

1、本研究依次從組織和細(xì)胞層面對(duì)20周孕齡人胎肝的發(fā)育程度和蛋白質(zhì)信息進(jìn)行探討.我們先在組織層次上從形態(tài)學(xué)角度闡述20周孕齡入胎肝的發(fā)育程度,以便對(duì)所提取的蛋白質(zhì)組成成分進(jìn)行功能分析,所采用的技術(shù)手段是HE染色.HE染色是最常用的組織化學(xué)染色方法,可以檢測(cè)組織和細(xì)胞基本形態(tài)結(jié)構(gòu),實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明20周孕齡人胎肝組織肝小葉和肝細(xì)胞板已基本形成,肝小葉之間可見初級(jí)和次級(jí)匯管區(qū),肝細(xì)胞索呈單行或雙行排列,肝竇內(nèi)充滿不成熟的造血細(xì)胞.可見20周孕齡人胎

2、肝是處于發(fā)育中期的器官.其次,我們對(duì)20周孕齡的人胎肝肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行提取和細(xì)胞內(nèi)全部表達(dá)的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,以了解胎肝細(xì)胞內(nèi)所表達(dá)的蛋白質(zhì)的信息.肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞提取過(guò)程中,肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞易破碎和純度較低是研究的瓶頸,我們構(gòu)建了以冷凍凝集為基礎(chǔ)的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞提取技術(shù)平臺(tái),使提取的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的純度達(dá)到95.3﹪.為了分析肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞內(nèi)全部蛋白質(zhì)信息,我們采用了二維電泳技術(shù)將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞內(nèi)全部蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,并通過(guò)優(yōu)化肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞裂解方法、凝膠制備方法、一向等