溫通法對(duì)荷瘤鼠延長(zhǎng)生存期及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用研究.pdf

1、　　目的：通過對(duì)荷S180腫瘤細(xì)胞昆明小鼠灌服溫通代表中藥附子、干姜、桂枝,觀察小鼠在不同濃度溫通中藥作用下生存期的變化,并從誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡方面揭示溫通法抑瘤機(jī)制,為溫通法在惡性腫瘤領(lǐng)域的應(yīng)用提供新的依據(jù)。
　　方法：建立S180小鼠模型,隨機(jī)分為空白組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組、環(huán)磷酰胺組,每組16只：8只觀察生存期,其余8只取材。中藥高、中、低劑量組小鼠于造模次日給予不同濃度的中藥灌胃,0.4ml/只,每

2、天1次；空白組于造模次日給予生理鹽水灌胃,0.4ml/只,每天1次；環(huán)磷酰胺組造模72h后給予環(huán)磷酰胺30mg/kg腹腔注射,隔日1次；各組于造模第12天停止用藥。每組處死8只小鼠,瘤體制作細(xì)胞懸液,采用Annexin-Ⅴ-FITC∕PI雙染,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率；分光光度法檢測(cè)Caspase-3活性。另外每組8個(gè)小鼠,記錄各小鼠生存時(shí)間并做生存分析。
　　結(jié)果：(1)生存期實(shí)驗(yàn)中,與空白組比較,中藥高、中劑量組均有顯著差

3、異( P<0.05 )、中藥低劑量組無顯著差異( P>0.05 )、環(huán)磷酰胺組有極顯著差異(P<0.01)；但中藥高劑量組與環(huán)磷酰胺組比較無顯著差異(P>0.05)。
　　(2)凋亡率檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中,與空白組比較,中藥各劑量組及環(huán)磷酰胺組細(xì)胞凋亡率均有極顯著差異(P<0.01)；中藥三個(gè)劑量組間隨著劑量的增大細(xì)胞凋亡率有所增高,各組間兩兩比較：中藥高劑量組與中藥低劑量組比較有顯著差異(P<0.05),其余均無顯著差異(P>0.05

4、)；中藥各劑量組細(xì)胞凋亡率均高于環(huán)磷酰胺組,與之相比有極顯著差異(P<0.01)。
　　(3)Caspase-3 活性檢測(cè)試驗(yàn)中,與空白組比較,中藥各劑量組及環(huán)磷酰胺組瘤細(xì)胞 Caspase-3 活性均有極顯著差異(P<0.01)；中藥三個(gè)劑量組間隨著劑量的增大瘤細(xì)胞Caspase-3活性逐漸提高,各組間兩兩比較：中藥高、中劑量組間無顯著差異(P>0.05),其余均有極顯著差異(P<0.01)；與環(huán)磷酰胺組比較,中藥各劑量組瘤