BRCA1對(duì)黃體酮刺激的乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移的影響及機(jī)制研究.pdf

1、研究背景和目的：
　　 乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤,占全身各種惡性腫瘤的7-10％。在西方發(fā)達(dá)國(guó)家中,乳腺癌己成為女性排第一位的惡性腫瘤致死病因。我國(guó)女性乳腺癌的發(fā)病率也逐年遞增,而且發(fā)病年齡越來越年輕。乳腺癌發(fā)生是多因素的,大量的研究表明乳腺癌與遺傳因素有關(guān),而BRCA1是與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的的遺傳因素。在遺傳性乳腺癌家族中,BRCA1的突變率大約為40-50％,而在乳腺癌卵巢癌的家族中,BRCA1的突變率高達(dá)80％

2、。并且,80％的BRCA1突變的女性攜帶者,最終可發(fā)展成乳腺癌患者。在散發(fā)性乳腺癌中BRCA1的表達(dá)降低。
　　 BRCA1是腫瘤抑制基因,參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控,參與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié),抑制細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞終末分化,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和參與細(xì)胞DNA損傷修復(fù),維持基因組的完整,是一個(gè)重要的細(xì)胞周期負(fù)調(diào)控子。
　　 BRCA1對(duì)乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移發(fā)揮重要作用。Fan等報(bào)道,BRCA1可以抑制雌激素受體的信號(hào)傳導(dǎo)； 2009年,Burg

3、a LN發(fā)現(xiàn),BRCA1突變?nèi)橄偕掀ぜ?xì)胞的增殖和乳腺癌擴(kuò)散能力的增強(qiáng)可能與表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)的活化有關(guān)。Razandi M等的研究發(fā)現(xiàn),野生型BRCA1可以抑制雌激素誘導(dǎo)的ERK的活性,野生型BRCA1可以明顯抑制ERK2的表達(dá),另外野生型BRCA1還可以抑制表皮生長(zhǎng)因子和胰島素樣生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的ERK活化和細(xì)胞增殖。BRCA1對(duì)乳腺癌細(xì)胞遷移的研究相對(duì)較少,1999年,Seery報(bào)道,BRCA1降低可能與散發(fā)性乳腺癌轉(zhuǎn)移有關(guān),

4、2008年,Yasmeen報(bào)道,BRCA1與乳腺癌細(xì)胞遷移和侵襲有關(guān),但沒有對(duì)機(jī)制作深入探討。
　　 黃體酮及其受體在乳腺癌的發(fā)生也起重要的作用。臨床調(diào)查顯示,進(jìn)行激素替代治療的女性,其乳腺癌發(fā)病率增高,而且,聯(lián)合應(yīng)用黃體酮和雌二醇的女性,其乳腺癌的發(fā)病率高于單獨(dú)使用雌二醇的女性。在切除卵巢的小鼠動(dòng)物模型中,聯(lián)合應(yīng)用雌二醇和黃體酮比單獨(dú)使用致癌物質(zhì)誘發(fā)乳腺癌的發(fā)病率低。與此相對(duì)的是,黃體酮對(duì)乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移的作用一直存在爭(zhēng)

5、議,這些研究結(jié)果的差異,可能是由于使用不同的細(xì)胞模型所致。
　　 有研究表明BRCA1可以調(diào)節(jié)黃體酮受體的活性,我們以前的研究也表明BREA1可以下調(diào)黃體酮受體的表達(dá)。但BRCA1是否通過調(diào)節(jié)黃體酮受體的表達(dá)而影響乳腺癌細(xì)胞的增殖與遷移卻研究卻報(bào)道甚少報(bào)道。本研究假設(shè)是:BRCA1通過下調(diào)黃體酮受體表達(dá)調(diào)節(jié)乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移。研究BRCA1、黃體酮受體和乳腺癌的增殖和遷移之間的關(guān)系,對(duì)于深入了解BRCA1的的致癌機(jī)制有重要意

6、義。
　　 方法
　　 用MTT和細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)分別檢查乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移；用黃體酮刺激乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和T-47D,觀察黃體酮對(duì)乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移的影響；過表達(dá)BRCA1,觀察過表達(dá)BRCA1如何影響黃體酮對(duì)乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　 一、黃體酮對(duì)培養(yǎng)乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移的影響
　　 1.黃體酮刺激乳腺癌細(xì)胞MCF-7和T-47D的增殖；
　　 2.

7、黃體酮促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞MCF-7和T-47D的遷移；
　　 3.黃體酮下調(diào)細(xì)胞粘附分子E-Cadherin表達(dá)。
　　 二、BRCA1調(diào)節(jié)乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)制研究
　　 1.BRCA1下調(diào)黃體酮受體的表達(dá);
　　 2.過表達(dá)BRCA1減弱黃體酮促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移的作用。
　　 結(jié)論
　　 1.黃體酮可以促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移；
　　 2.BRCA1可能通過下調(diào)黃體酮受