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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討羅格列酮(rosiglitazone,ROS)對(duì)耐他莫昔芬(tamoxifen,TAM)乳腺癌細(xì)胞MCF-7/TAM增殖的影響,及對(duì)其耐藥性的逆轉(zhuǎn)效果和作用機(jī)制。
方法:
不同濃度 ROS(0、50、100、150、200、250μmol/L)分別作用于MCF-7/TAM細(xì)胞,采用MTT法于24、48和72h后測(cè)定ROS對(duì)MCF-7/TAM細(xì)胞的抑制率,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ROS作用MCF-7/T
2、AM細(xì)胞48h后的凋亡率;不同濃度TAM(0.1、1、10、20、40μmol/L)分別作用于MCF-7、MCF-7/TAM和IC50濃度(136μmol/L)ROS預(yù)處理48h的MCF-7/TAM細(xì)胞48h后,采用MTT法測(cè)定TAM對(duì)三種細(xì)胞的抑制率;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)ROS作用MCF-7/TAM細(xì)胞后對(duì)FOXA1、ERa、ErbB-2和P53基因表達(dá)的影響。
結(jié)果:
1.不同濃度ROS(0、50、10
3、0、150、200、250μmol/L)分別作用于MCF-7/TAM細(xì)胞24 h、48 h和72 h,作用24 h后其增殖抑制率從14.2%升為62.1%,作用48h后其抑制率從21.7%升為64.4%,作用72h后其抑制率從33.7%升為74.4%,ROS對(duì)MCF-7/TAM細(xì)胞的抑制作用與濃度和時(shí)間呈正相關(guān)。
2.不同濃度TAM(0.1、1、10、20、40μmol/L)作用于MCF-7、MCF-7/TAM及予以 IC50
4、濃度 ROS預(yù)處理的MCF-7/TAM細(xì)胞48 h,IC50值分別為(6.81?0.02)μmol/L、(17.92?0.03)μmol/L和(8.76?0.01)μmol/L,耐藥倍數(shù)為2.63(t=51.20,P<0.05),逆轉(zhuǎn)耐藥倍數(shù)為2.05(t=65.32,P<0.05)。
3.不同濃度ROS(150、200、250μmol/L)分別作用MCF-7/TAM細(xì)胞48 h后,細(xì)胞凋亡率分別為(16.20±0.30)%、
5、(22.53±0.15)%和(27.53±0.35)%,與對(duì)照組的(3.23±0.04)%相比,凋亡率增加(F=5559,P<0.05)。
4.IC50濃度ROS(136μmol/L)作用MCF-7/TAM細(xì)胞48h后,能夠上調(diào)FOXA1、ERa和P53基因(P<0.05)表達(dá)水平,下調(diào)ErbB-2基因(P<0.05)表達(dá)水平。
結(jié)論:
50μmol/L以上濃度ROS可抑制MCF-7/TAM細(xì)胞增殖,150
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