碳酸飲料對(duì)大鼠血清APN及ox-LDL-LOX-1水平的影響.pdf

1、目的：通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA），檢測飲用不同種類、劑量碳酸飲料大鼠血清脂聯(lián)素（APN）及氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）水平，免疫組化法（SABC）測定血凝素樣氧化型低密度脂蛋白受體l（LOX-1）蛋白在大中動(dòng)脈的表達(dá)，推測長期大量飲用碳酸飲料是否與心血管發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)具有相關(guān)性，并為下一步深入研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：⑴將40只2月齡120g-180g健康SD大鼠隨機(jī)分成5組：正常對(duì)照組及飲用4組不同劑量、不同種類碳酸飲

2、料模型組：正常對(duì)照組每日給予自來水喂養(yǎng)，其余4組分別給予有糖碳酸飲料160ml/kg/d（A組），有糖碳酸飲料80ml/kg/d（B組）,無糖碳酸飲料160ml/kg/d（C組）,無糖碳酸飲料80ml/kg/d（D組）喂養(yǎng)。每4周稱重一次，連續(xù)12周。⑵12周后每組大鼠禁食12h取股動(dòng)脈血3ml，以3000rpm離心20min，分離血清，-40℃保存待測；分別取出心肌、肝臟，游離主動(dòng)脈、腎動(dòng)脈0.5-1cm，放入福爾馬林保存?zhèn)錂z。⑶酶法

3、檢測血總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、空腹血糖（FBG）。⑷放免法測胰島素（FINS）水平，計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）。⑸酶聯(lián)免疫法檢測血清脂聯(lián)素（APN)、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）含量。⑹HE染色法做心肌、肝臟、主動(dòng)脈及腎動(dòng)脈病理切片，免疫組化法測定LOX-1蛋白在大中動(dòng)脈表達(dá)。
　　結(jié)果：①HE染色顯示：各組大鼠主動(dòng)脈、腎動(dòng)脈組織病理學(xué)變化；正常對(duì)照組，動(dòng)脈

4、內(nèi)膜連續(xù)完整而光滑，中膜平滑肌走行清晰,無增生；彈力纖維未見異常，無明顯脂質(zhì)沉淀；A、C組，脂質(zhì)沉著和梭形細(xì)胞增生，內(nèi)彈力板斷裂，不完整，中層變性表現(xiàn)彈力組織網(wǎng)斷裂，平滑肌玻璃樣變性，膠原變性，外膜纖維化及慢性炎性細(xì)胞浸潤；B、D組，稍好于A、C組。各組大鼠肝臟病理學(xué)變化：正常對(duì)照組，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,肝細(xì)胞索呈放射狀均勻排布,無脂肪變肝細(xì)胞；A、C組，肝細(xì)胞索紊亂，肝板結(jié)構(gòu)消失，肝細(xì)胞溶解，細(xì)胞間界限不清，肝細(xì)胞有不同程度的脂肪變,細(xì)胞

5、質(zhì)中可見大量脂肪樣空泡，形成網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)；出現(xiàn)核固縮，胞核核仁及染色質(zhì)不均勻；肝血竇消失，可見少量的炎細(xì)胞及紅細(xì)胞；B、D組，肝細(xì)胞脂肪變程度與A、C組無明顯差異。各組大鼠心肌病理學(xué)變化：正常對(duì)照組，心肌細(xì)胞呈圓柱狀，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，心肌細(xì)胞連接成纖維狀，肌原纖維粗細(xì)不等，心肌纖維間有少量結(jié)締組織；A、C組，可見肌纖維內(nèi)有輕度大小不同的空泡存在；B、D組與A、C組無明顯差異。②免疫組化表達(dá)：模型A、B、C、D組LOX-1蛋白在主動(dòng)脈、

6、腎動(dòng)脈的表達(dá)較對(duì)照組顯著升高（P＜0.01），其中在主動(dòng)脈中的表達(dá)在C、D兩組間比較有差異性（P＜0.05），在腎動(dòng)脈中的表達(dá)在A B、A C、C D等兩組間比較有差異性（P＜0.01）。③模型A、B、C、D組APN較對(duì)照組降低（P＜0.05），APN水平在AB兩組間及CD兩組間比較有差異性（P＜0.05）；模型A、B、C、D組ox-LDL較對(duì)照組升高（P＜0.05），ox-LDL水平在A B兩組間及C D等兩組間比較有差異性（P＜0.

7、05）。④模型A、B、C、D組FPG、INS、HOMA-IR較對(duì)照組升高（P＜0.05）；HOMA-IR在AB兩組間及CD兩組間比較有差異性（P＜0.05）。⑤模型A、B、C、D組TG、TC、LDL較對(duì)照組升高（P＜0.05），HDL較對(duì)照組降低（P＜0.05），TG水平在AB兩組間及AC兩組間比較有差異性（P＜0.05）。⑥模型A、B、C、D組大鼠體重高于正常對(duì)照組(P＜0.05)。
　　結(jié)論：⑴長期飲用有糖碳酸飲料（代替全部飲